申请/专利权人：宁波甲贝医药科技有限公司

申请日：2023-09-20

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN117604071A

主分类号：C12Q1/68

分类号：C12Q1/68

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开

摘要：本发明提供了一种基于质谱的质粒DNAPolyA尾长度及分布的检测方法，该方法包括：步骤S1，在质粒DNA的完整PolyA序列上下游两侧寻找酶切位点，并根据酶切位点选择限制性内切酶；步骤S2，采用限制性内切酶对质粒DNA进行酶切，得到含有双链DNAPolyA的溶液；步骤S3，从含有双链DNAPolyA的溶液中富集纯化分离双链DNAPolyA，得到双链DNAPolyA；步骤S4，采用LC‑MS对双链DNAPolyA进行上机检测。该检测方法可通过选择不同的DNA限制性内切酶酶切位点实现质粒DNA的分段式PolyA尾的完整检测或分段检测以及连续式PolyA尾的完整检测，并且液质联用法根据PolyA尾片段分子量的差异准确对其长度及分布进行表征和相对定量，具有检测时间短、价格低、通用性强、专属性和灵敏度高的优点。

主权项：1.一种基于质谱的质粒DNAPolyA尾长度及分布的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，在质粒DNA的完整PolyA序列上下游两侧寻找酶切位点，并根据酶切位点选择限制性内切酶；步骤S2，采用所述限制性内切酶对所述质粒DNA进行酶切，得到含有双链DNAPolyA的溶液；步骤S3，从所述含有双链DNAPolyA的溶液中富集纯化分离双链DNAPolyA，得到双链DNAPolyA；步骤S4，采用LC-MS对所述双链DNAPolyA进行上机检测。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 宁波甲贝医药科技有限公司 一种基于质谱的质粒DNA Poly A尾长度及分布的检测方法

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