申请/专利权人：天津和创生物技术有限公司

申请日：2022-08-22

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN117604113A

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11;C12N5/0775;C12N5/077

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.02.27#公开

摘要：本发明提供了一种人间充质干细胞分化成骨能力的检测方法，通过诱导成骨培养基培养后，应用实时荧光定量PCR方法检测细胞内成骨转录因子及成骨标志蛋白的mRNA水平，实现对干细胞分化成骨能力的定量评价。本发明的方法可实现快速精确的定量检测，检测周期短，灵敏度高，适用范围广，可用于不同来源、不同批次、不同代次干细胞的分化成骨能力的检测、评价，可作为标准化方法用于干细胞质量控制。

主权项：1.一种人间充质干细胞分化成骨能力的检测方法，包括以下步骤：1铺板：当干细胞培养瓶内的细胞融合率达到75-85％时，消化，离心，弃去上清液，加入适量培养基重悬细胞，计数，调整细胞密度，铺板；2诱导：铺板后，当细胞融合度到80％-90％时，更换诱导培养基，连续培养，取不同诱导时间点的诱导样品，低温保存；其中所述诱导培养基为DMEMF12Basic培养基中加入FBS、双抗、L-谷氨酰胺、地塞米松、2-磷酸抗坏血酸、β-甘油磷酸二钠盐、胰岛素；3检测：提取样品RNA，并逆转录为cDNA，以逆转录的cDNA为模板，使用实时荧光定量PCR对目标基因和内参基因进行扩增检测；4数据处理：同时测定样品中目标基因和内参基因的CT值，计算样品的目标基因相较空白样品的目标基因的相对表达倍数。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津和创生物技术有限公司 一种人间充质干细胞分化成骨能力的检测方法

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