申请/专利权人：北京大学

申请日：2023-09-08

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN117683713A

主分类号：C12N5/0783

分类号：C12N5/0783;C12N5/0789;C12N5/0735;C12N5/074;A61K35/17;A61P35/00

优先权：["20220909 CN 2022111042125"]

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开

摘要：本发明公开了利用人多潜能干细胞体外制备T淋巴细胞和或NK细胞的方法。本发明提供了制备T淋巴细胞和或NK细胞的方法，包括：1将多潜能干细胞在中胚层诱导培养基中培养，获得中胚层细胞；2将中胚层细胞在生血内皮诱导培养基中培养，获得生血内皮细胞；3将生血内皮细胞在造血祖细胞诱导培养基中培养，获得CD34+造血祖细胞；4将CD34+造血祖细胞与表达DLL4的基质细胞及凝胶共聚集，在T淋巴诱导培养基中培养，获得T淋巴细胞；5将CD34+造血祖细胞与同时分化产生的贴壁基质细胞共培养，在NK细胞诱导培养基中继续培养，获得NK细胞。本发明方法中所使用的培养基成分明确，可高效制备出大量功能性T淋巴细胞和或NK细胞。

主权项：1.制备T淋巴细胞和或NK细胞的方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：将诱导多能干细胞iPS或胚胎干细胞在中胚层诱导培养基中培养，获得中胚层细胞；其中，所述中胚层诱导培养基为在早期基础培养基中添加Wnt信号激活剂例如WNT3a,或CHIR-99021和bFGF获得的；将获得的中胚层细胞在生血内皮诱导培养基中培养，获得生血内皮细胞；将获得的生血内皮细胞在造血祖细胞诱导培养基中培养，获得造血祖细胞，从中分选CD34+造血祖细胞；其中，所述造血祖细胞诱导培养基包括IL3、IL6和IL7；和将获得的CD34+造血祖细胞与表达DLL4的基质细胞及凝胶共聚集，在T淋巴细胞诱导培养基中培养，获得T淋巴细胞；和或将获得的CD34+造血祖细胞与同时分化产生的贴壁基质细胞例如，内皮细胞或间充质细胞共培养，在NK细胞诱导培养基中继续培养，获得NK细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京大学 利用人多潜能干细胞体外制备T淋巴细胞和NK细胞

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