申请/专利权人：柳州市工人医院

申请日：2023-12-13

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN117683901A

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12N5/078;C12Q1/02

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开

摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及MT1X驱动氧化应激下破骨细胞形成作用机制的研究方法，包括以下步骤：a.检测PMOP骨组织的破骨细胞、PMOP骨组织的破骨细胞前体以及骨髓单核细胞中MT1X的表达水平；b.PMOP的骨髓单核细胞中ROS强度与MT1X表达的检测；c.氧化应激下，RANKL诱导人破骨细胞分化中ROS强度、破骨细胞形成与MT1X表达的检测；d.RANKL诱导下，骨髓单核细胞来源的人OCP中不同氧化应激对MT1X影响；e.不同氧化应激下，RANKL诱导人破骨细胞分化中的相关指标的检测；本发明有望阐明MT1X驱动氧化应激下破骨细胞形成作用及机制，为绝经后骨质疏松症PMOP的发病提供新观点，也为PMOP的防治提供新的理论依据和潜在靶点。

主权项：1.MT1X驱动氧化应激下破骨细胞形成作用机制的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：a.检测PMOP骨组织的破骨细胞、PMOP骨组织的破骨细胞前体以及骨髓单核细胞中MT1X的表达水平；b.PMOP的骨髓单核细胞中ROS强度与MT1X表达的检测；c.氧化应激下，RANKL诱导人破骨细胞分化中ROS强度、破骨细胞形成与MT1X表达的检测；d.RANKL诱导下，骨髓单核细胞来源的人OCP中不同氧化应激对MT1X影响；e.不同氧化应激下，RANKL诱导人破骨细胞分化中的相关指标的检测；所述研究方法分别从整体、细胞与分子水平出发，系统研究MT1X驱动氧化应激在破骨细胞形成中的作用及机制，包括：1鉴定PMOP骨组织中MT1X表达情况，以及MT1X与ROS间的相关性，包括：①利用免疫荧光双染验证PMOP骨组织的破骨细胞、PMOP骨组织的破骨细胞前体和骨髓单核细胞中MT1X的表达情况；②利用流式细胞鉴定法明确PMOP患者骨髓单核细胞中MT1X阳性细胞数量；③利用荧光染色确定PMOP骨组织中ROS强度和MT1X间的关系；④明确PMOP骨髓单核细胞中ROS强度与MT1X之间的相关性；2探究氧化应激对MT1X的影响及MT1X对破骨细胞形成的作用，包括：①以骨髓单核细胞作为实验目标，利用慢病毒转导过表达或沉默MT1X以及利用免疫荧光染色鉴定氧化应激下，RANKL诱导下的人OCP中MT1X表达与ROS强度间的关系；②利用Westernblotting法和免疫荧光鉴定RANKL诱导下的人OCP中不同氧化应激对于MT1X表达的影响；③利用慢病毒转导和TRAP染色法鉴定氧化应激下，MT1X对于单核细胞向成熟破骨细胞分化的作用；3剖析MT1X调控的ROS对RANKL诱导下的破骨细胞形成的具体机制，包括：①以骨髓单核细胞作为实验目标，利用Westernblotting、免疫荧光、AVPI染色、罗丹明染色、台盼蓝染色和EdU分析不同氧化应激下，RANKL诱导的人OCP中JNK1活性、Bcl2磷酸化、自噬、凋亡、细胞总死亡、细胞增殖和破骨细胞分化的具体水平，以及与MT1X表达间的关系；②分析不同氧化应激下，RANKL诱导的人OCP中ROS强度与JNK1活性间的关系；③利用免疫共染明确不同氧化应激下，RANKL诱导的人OCP中MT1X与活化JNK1、磷酸化Bcl2间的关系。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 柳州市工人医院 MT1X驱动氧化应激下破骨细胞形成作用机制的研究方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD