申请/专利权人：江苏海洋大学

申请日：2023-11-29

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN117679452A

主分类号：A61K36/481

分类号：A61K36/481;A61K36/28;A61P3/10;A61P13/12;G01N30/36

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开

摘要：本发明提供了一种大孔树脂纯化黄芪牛蒡子复方提取物的方法，包括以下步骤：黄芪牛蒡子复方提取液的制备、大孔树脂的预处理、上样、洗脱、黄芪牛蒡子复方中总木脂素、总黄酮和总酚酸的吸附率和解吸率、采用HPLC法测定大孔树脂分离纯化后的黄芪牛蒡子复方提取物中7种单一成分含量，提供了一种纯化黄芪牛蒡子复方提取物的最佳工艺，操作简便，得率高，为进一步的制剂学和药效学研究提供借鉴。

主权项：1.一种大孔树脂纯化黄芪牛蒡子复方提取物的方法，其特征在于：所述方法如下：步骤一：原料准备：黄芪、炒牛蒡子；步骤二：将黄芪牛蒡子饮片用55％乙醇、1:15的料液比、90分钟回流提取两次，合并提取液，减压浓缩得黄芪牛蒡子复方粗提液，稀释至所需浓度，冷藏备用；步骤三：对黄芪牛蒡子提取液中总木脂素、总黄酮和总酚酸的含量进行测定，其中总黄酮含量采用NaNO2溶液-AlNO33溶液-NaOH溶液显色法测定，总酚酸含量采用Folin-Ciocaileu法测定；步骤四：确定多指标均一化综合评价方法，以X表示试验中指标成分的测定值，通过公式将多组数据转化为无单位的Z-Score分值，对数据进行标准化处理，提高数据可比性；步骤五：将大孔树脂置于烧杯中，用95％乙醇浸泡24h后，将树脂装于层析柱中，控制使树脂层无气泡产生，取95％乙醇上柱洗脱，直至洗脱液不变浑浊后停止，再用纯化水冲洗树脂至无醇味，接着用4％HCl溶液浸泡3h，用纯化水冲洗树脂至中性，再用4％NaOH溶液浸泡3h，用纯化水冲洗树脂至中性，即可得处理好的大孔树脂，将树脂加纯化水浸泡于烧杯中备用；步骤六：大孔树脂对黄芪牛蒡子复方提取物稀释液的静态吸附与解吸；步骤七：大孔树脂对黄芪牛蒡子复方提取物稀释液的动态吸附与解吸；a.依次调节上样液浓度为0.1～0.5gmL；上样流速为1～4BVh；径高比1:3～1:14；除杂用水量；乙醇洗脱液浓度为50％～90％；洗脱流速为1～5BVh；洗脱溶液体积进行单因素考察，并绘制筛选树脂的动态泄露曲线与洗脱曲线，根据a.考察结果筛选出上样液浓度、上样流速、洗脱液浓度和洗脱流速四因素，以步骤三中Z为优化指标，使用正交试验表L934进行黄芪牛蒡子复方提取物纯化方法优化；步骤八：采用HPLC法测定大孔树脂分离纯化前后的黄芪牛蒡子复方提取物中绿原酸、异绿原酸C、芒柄花苷、牛蒡苷、毛蕊异黄酮、牛蒡苷元、芒柄花素7种单一成分含量。

全文数据：

权利要求：

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