申请/专利权人:中国科学院城市环境研究所
申请日:2023-12-08
公开(公告)日:2024-03-12
公开(公告)号:CN117686296A
主分类号:G01N1/28
分类号:G01N1/28;G01N21/31;G01N33/48;G01N33/50;G01N33/52;G01N33/68;C12Q1/68
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开
摘要:本发明公开了一种提高生物样品中丙二醛含量测定准确性的方法,包括向丙二醛标准溶液中加入缓冲液、蛋白酶溶液和硫代巴比妥酸TBA,测定丙二醛标准溶液的吸光度;随后构建标准曲线,通过测得的生物样品溶液的吸光度计算得到生物样品中丙二醛的实际浓度。本发明方法样品处理过程简单,使用的BufferA缓冲液和蛋白酶可以使得与蛋白质结合的MDA释放,不仅可以避免蛋白沉淀对MDA与TBA的红色复合物的吸附干扰和上清抽取限制,也可以检测到蛋白质结合态的MDA,能显著提高样品的检测限,选择性好,提高了检测结果的准确性,还可以用于临床珍贵样品的微量检测。
主权项:1.一种提高生物样品中丙二醛含量测定准确性的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:向丙二醛标准溶液中加入缓冲液和蛋白酶溶液,在50-60℃下孵育10-30min,随后加入TBA试剂,密封后于90-110℃下反应20-40min,最后测定丙二醛标准溶液在532nm处的吸光度A1;S2:以丙二醛标准溶液的浓度c1为横坐标、吸光度A1为纵坐标进行线性拟合,构建标准曲线y=ax+b,其中a、b为常数;S3:制备生物样品溶液;S4:用等体积的生物样品溶液代替步骤S1中的丙二醛标准溶液,加入缓冲液和蛋白酶溶液后在相同条件下孵育-反应,然后测得生物样品溶液在532nm处的吸光度A2,最后根据步骤S2得到的标准曲线,计算得到生物样品溶液中丙二醛的浓度c2;S5:经过计算得到生物样品中丙二醛的实际浓度c实际值,计算公式如下: 式中,A空白值为去离子水在在532nm处的吸光度。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院城市环境研究所 一种提高生物样品中丙二醛含量测定准确性的方法
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