申请/专利权人：大连理工大学

申请日：2022-05-23

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN115029348B

主分类号：C12N15/113

分类号：C12N15/113;G01N33/569;G01N33/58

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.12#授权;2022.09.30#实质审查的生效;2022.09.09#公开

摘要：本发明公开了一种可识别椰毒假单胞菌的链状脱氧核酶探针及应用，属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的底物链、文库酶链和连接链混合后连接，构建链状DNA文库，进行反向筛选，分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带，所得的DNA条带构建链状DNA文库，进行正向筛选，分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带，进行PCR扩增，回收正义链，进行重复筛选，得到链状脱氧核酶探针，该探针能够高特异性检测椰毒假单胞菌，具有在生物传感应用方面发挥优势的潜力。

主权项：1.一种脱氧核酶探针，其特征在于，所述脱氧核酶探针的核苷酸序列为如下序列1～4中的任一个：15’-CACGGATCCTGACAAGGGAGCTCGCAGGTTCGACGGAAGGATGCCGCATTGAGTCGCCAGTAAACTGGGGAGACGGCTGGAAGGGTCAGCTCCGTCCGACTCTTCCTAGCFRQGGTTCGATCAAGA-3’；25’-CACGGATCCTGACAAGGTTAAGGATCGGCAGATAATTGAGTCGCCGCGATGACGCGGGGAGACGGCTTCGGAAGAGAGAGGGTTCTCAGCTCCGTCCGACTCTTCCTAGCFRQGGTTCGATCAAGA-3’；35’-GCATTGAGTCGCCAGTAAACTGGGGAGACGGGCTAGGAAGAGTACTCTTCCTAGCFRQGGTTCGATCAAGA-3’；其中，序列1、序列2或序列3构成顺式结构脱氧核酶；序列1是SEQIDNO:11所示序列与底物链RS28连接后对应的序列；序列2是SEQIDNO:12所示序列与底物链RS28连接后对应的序列；序列3是SEQIDNO:13所示序列与底物链RS28连接后对应的序列；4SEQIDNO:11、SEQIDNO:12或SEQIDNO:13所示的序列与底物链序列构成反式结构脱氧核酶；所述底物链序列为：5’-ACTCTTCCTAGCFRQGGTTCGATCAAGA-3’；其中R表示RNA碱基A，F表示含有荧光基团的T碱基，Q表示含有淬灭基团的T碱基；所述反式结构即SEQIDNO:11、SEQIDNO:12或SEQIDNO:13所示的序列与底物链不建立连接时，SEQIDNO:11、SEQIDNO:12或SEQIDNO:13所示的序列对底物链进行的切割。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 大连理工大学 一种识别椰毒假单胞菌的链状脱氧核酶探针及应用

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