申请/专利权人:赛纳生物科技(北京)有限公司
申请日:2022-01-28
公开(公告)日:2024-04-12
公开(公告)号:CN114317679B
主分类号:C12Q1/48
分类号:C12Q1/48
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.12#授权;2022.04.29#实质审查的生效;2022.04.12#公开
摘要:本发明公开一种末端脱氧核苷酸转移酶的活性检测方法,利用单链DNA以及单链DNA结合染料,将末端脱氧核苷酸转移酶的活性与荧光强度相对应。本方法具有易操作、灵敏度高、稳定性好、检测范围大等特点,相比于传统的检测方法,本方法不涉及放射性同位素,对环境更友好。
主权项:1.一种末端脱氧核苷酸转移酶的活性检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1建立多个反应体系,每一反应体系包括单链DNA以及过量的单链DNA染料,所述多个反应体系具有不同的单链DNA浓度,测定每一反应体系对应的荧光强度,获得荧光强度与单链DNA浓度的相对关系;2建立反应体系1和反应体系2,其中,所述反应体系1包括一定量的所述单链DNA,过量的所述单链DNA染料,过量的脱氧核苷酸底物,反应稳定后,得到荧光强度1;所述反应体系2包括与反应体系1等量的单链DNA,过量的所述单链DNA染料,过量的脱氧核苷酸底物,以及一定量的待测末端脱氧核苷酸转移酶,反应稳定后,得到荧光强度2;3计算荧光强度2与荧光强度1的荧光差值,结合所述荧光强度与单链DNA浓度的相对关系,计算得到待测末端脱氧核苷酸转移酶催化延伸的单链DNA的量,则得到所述待测末端脱氧核苷酸转移酶的活性;所述单链DNA染料是可以结合单链DNA的荧光染料OliGreenssDNAreagent。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 赛纳生物科技(北京)有限公司 一种末端脱氧核苷酸转移酶的活性检测方法
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