申请/专利权人：首都医科大学附属北京儿童医院

申请日：2023-08-29

公开（公告）日：2024-04-23

公开（公告）号：CN117129596B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/88

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.23#授权;2023.12.15#实质审查的生效;2023.11.28#公开

摘要：本发明属于医药生物领域，涉及基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立。本发明的目的在于建立一种稳定、操作简便、检测时间短、灵敏度高的反相高效液相色谱法的检测方法，以实现对2’,3’‑cGAMP的定量检测。

主权项：1.一种反相高效液相定量检测2’,3’-cGAMP的方法，其特征在于，包括以下步骤：取待测样品，以高效液相色谱法对待测样品进行检测，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为15~50mM三乙基乙酸铵缓冲液，pH=6.2~8.2；流动相B为乙腈溶液；流动相A和流动相B一定的比例进行梯度程序：在0~20min内，流动相A由100%降至87%，流动相B由0升至13%；在20~23min内，流动相A由87%降至60%，流动相B由13%升至40%；在23~25min内，流动相A由60%恢复至起始100%，流动相B由40%降至0；在25~35min内，流动相A保持100%，流动相B保持0；其中，流动相的流速为0.5~1.2mLmin，进样量为20μL；其中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂选择AgilentZORBAXSB-C18柱，柱长为250mm，柱内径为4.6mm，柱粒度为5μm；其中，所述的待测样品为标准品溶液和供试品溶液；其中，所述的标准品溶液按照以下方法配制得到：称取2’,3’-cGAMP标准品配制成200ugmL浓度的溶液，依次稀释成40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μgmL浓度的标准品溶液；其中，所述的供试品溶液为：取2’,3’-cGAMP的纳米制剂，使用超滤管离心，取上下层溶液，过滤，即得供试品溶液。

全文数据：

权利要求：

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