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【发明授权】基于双DNA四面体结构检测FR的电化学生物传感器_上海健康医学院_202010612665.3 

申请/专利权人:上海健康医学院

申请日:2020-06-30

公开(公告)日:2024-03-12

公开(公告)号:CN113866234B

主分类号:G01N27/327

分类号:G01N27/327

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.03.12#授权;2022.01.21#实质审查的生效;2021.12.31#公开

摘要:本发明属于生物领域,具体涉及一种基于双DNA四面体结构检测FR的电化学生物传感器。所述生物传感器包括探针和修饰电极。所述探针包括带有叶酸的DNA四面体靶向探针和带有叶酸的DNA四面体信号放大探针。本发明构建了一种操作简单,灵敏度高的检测叶酸受体的生物传感器,该生物传感器基于DNA四面体设计,具有灵敏度高、特异性好、操作简单和无污染等优点。

主权项:1.一种生物传感器,其特征在于,其为基于双DNA四面体纳米结构的生物传感器,所述生物传感器包括探针和修饰电极;所述探针包括带有叶酸的DNA四面体靶向探针和带有叶酸的DNA四面体信号放大探针,所述带有叶酸的DNA四面体靶向探针的制备方法包括:S1:将A、S-B、S-C以及S-D四条DNA单链、TCEP以及10×PBS缓冲液混匀;S2:在梯度PCR仪中90-100°C加热2-4min后,在20-40s内迅速降温至3-5°C并保持30s以上,得到四面体探针;S3:将四面体探针与经EDC和NHS活化后的叶酸等体积混合均匀后,置于温度控制和混匀器中,37°C,300rpm反应1-3h,得到带有叶酸的DNA四面体靶向探针;所述单链A、S-B、S-C以及S-D的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;所述带有叶酸的DNA四面体信号放大探针的制备方法包括:S1:将A、B-B、B-C以及B-D四条DNA单链、TCEP以及10×PBS缓冲液混匀;S2:在梯度PCR仪中90-100°C加热2-4min后,在20-40s内迅速降温至3-5°C并保持30s以上,得到四面体探针;S3:将四面体探针与经EDC和NHS活化后的叶酸等体积混合均匀后,置于温度控制和混匀器中,37°C,300rpm反应1-3h,得到带有叶酸的DNA四面体信号放大探针;所述单链A、B-B、B-C以及B-D的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6和SEQIDNO:7,所述SEQIDNO:5为Biotin-TATCACCAGGCAGTTGACAGTGTAGCAAGCTGTAATAGATGCGAGGGTCCAATAC;所述SEQIDNO:6为Biotin-TCAACTGCCTGGTGATAAAACGACACTACGTGGGAATCTACTATGGCGGCTCTTC;所述SEQIDNO:7为Biotin-TTCAGACTTAGGAATGTGCTTCCCACGTAGTGTCGTTTGTATTGGACCCTCGCAT。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海健康医学院 基于双DNA四面体结构检测FR的电化学生物传感器

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