申请/专利权人：南京轩凯生物科技股份有限公司

申请日：2022-08-26

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN115232226B

主分类号：C08B37/00

分类号：C08B37/00;C12P19/04;C12N1/20;C12R1/01

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2023.01.31#著录事项变更;2022.11.11#实质审查的生效;2022.11.11#著录事项变更;2022.10.25#公开

摘要：本发明提供了一种骆驼刺泛菌胞外多糖提取方法，包括如下步骤：（1）调节驼刺泛菌胞外多糖的发酵液的pH至11~12；（2）将（1）处理后得到的发酵液在80~90℃加热下反应，静置使菌体自然沉降，弃去沉降的菌体，保留微微浑浊的上清层；（3）向（2）处理后得到的上清层中加入珍珠岩，搅拌均匀后通过板框压滤机过滤除去菌体，得到澄清的滤液；（4）向（3）处理后得到的滤液中加入去离子水进行稀释，搅拌均匀后，使用陶瓷膜过滤器进行脱盐脱色处理，当透过液pH=6.5~7，电导率≤900μscm后结束过滤，保留浓缩液；（5）将（4）处理后得到的浓缩液喷雾干燥，即得纯化的泛菌多糖。本发明制备的泛菌多糖，纯度≥92%，分子量≥1000kDa，多糖易溶解。

主权项：1.一种骆驼刺泛菌胞外多糖提取方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）调节驼刺泛菌胞外多糖的发酵液的pH至11~12，所用骆驼刺泛菌为PantoeaalhagiXK-11，菌种保藏号为CGMCCNO.15525，发酵液中胞外多糖含量≥2%，分子量≥1500kDa；（2）将（1）处理后得到的发酵液在80~90℃加热下反应，反应时间为60-90min，静置6h以上，静置使菌体自然沉降，弃去沉降的菌体，保留微微浑浊的上清层；（3）向（2）处理后得到的上清层中加入珍珠岩，搅拌均匀后通过板框压滤机过滤除去菌体，得到澄清的滤液；（4）向（3）处理后得到的滤液中加入去离子水进行稀释，搅拌均匀后，使用陶瓷膜过滤器进行脱盐脱色处理，当透过液pH=6.5~7，电导率≤900μscm后结束过滤，保留浓缩液；（5）将（4）处理后得到的浓缩液喷雾干燥，即得纯化的泛菌多糖；其中，步骤（1）中，所述驼刺泛菌胞外多糖的发酵液通过如下步骤得到：1）将在固体平板上培养的菌种接种至新鲜的LB液体培养基中，在37℃，200rpm条件下培养10-12h，获得种子液；2）种子液以1%~8%vv的接种量转接至泛菌多糖的发酵培养基中，发酵温度为30℃，pH控制在6.6~7.2，通气量为0.7vvm，搅拌转速为700-800rpm，发酵24h，即获得骆驼刺泛菌XK-11胞外多糖的发酵液；所述发酵培养基组成如下：蔗糖60gL、蛋白胨10gL、NaCl10gL、磷酸氢二钠1.9gL和磷酸二氢钠0.792gL，pH调至7.1；步骤（2）中，反应时间为60-90min，静置6-8h，珍珠岩的加入量为上清液质量的1%~2%；板框压滤机使用滤布的规格为400-600目；陶瓷膜孔径为10000Da。

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权利要求：

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