申请/专利权人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司

申请日：2022-11-18

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN116034872B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2023.05.19#实质审查的生效;2023.05.02#公开

摘要：本发明公开了一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，通过使用无菌镊子在超净工作台内将贺兰山女蒿组织培养过程中产生的玻璃化愈伤组织和不定芽与正常组织分离开来，转移到去玻璃化的培养基中进行组织培养。待部分玻璃化愈伤组织和不定芽恢复正常状态后，再转移至相同培养基中继续培养，最后将生长良好的再生苗取出放入生根培养基中进行生根培养。应用本技术可以使贺兰山女蒿组织培养过程中产生的玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化，再经继代培养形成正常的再生植株。

主权项：1.一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽处理：在超净工作台内将贺兰山女蒿组织培养过程中产生的玻璃化愈伤组织和不定芽与正常组织分离开，分成适宜大小，转移至去玻璃化培养基上进行组织培养，直至玻璃化愈伤组织和不定芽恢复正常状态；（2）处理后的愈伤组织和不定芽培养：将步骤（1）中恢复正常状态的贺兰山女蒿愈伤组织和不定芽在超净台内转移至相同培养基上继续培养25-30天后，将生长状态良好的再生苗转移到生根培养基中培养；（3）如果在后续培养过程中贺兰山女蒿的愈伤组织和不定芽再次出现玻璃化迹象，重复步骤（1）和（2）；其中，步骤（1）中，所述的去玻璃化培养基成分如下：4.43gLMS培养基，30gL蔗糖，0.25mgL6-BA，0.01mgLNAA，7.5gL琼脂，余量为蒸馏水，培养基的pH值为5.8-5.9；步骤（1）培养条件为温度25±2℃，相对湿度为60％，光照时间14hd，光强为1500~2000lx；步骤（2）中，所述的生根培养基成分如下：12MS培养基，30gL蔗糖，0.3mgLNAA，7.0gL琼脂，余量为蒸馏水，培养基的PH调整为5.8-5.9。

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