申请/专利权人：翌圣生物科技(上海)股份有限公司

申请日：2021-06-17

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN113322523B

主分类号：C40B50/06

分类号：C40B50/06;C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2021.09.17#实质审查的生效;2021.08.31#公开

摘要：本发明提供一种RNA快速建库方法Easy‑seq，其步骤包括：提取样本中的totalRNA，采用逆转录阻碍探针法去除rRNA，同时逆转录获得一端带有P7序列的cDNA；对多余的随机引物进行消解处理；对cDNA进行多聚腺苷酸化，在cDNA的3’端加上polyA，采用带有3’突出末端的双链DNA接头，在cDNA的另一端接上P5序列；文库扩增及回收。Easy‑seq具有耗时短、操作简单和损失小等优点，因此可以应用于单细胞转录组测序scEasy‑seq。相较于已有的scRNA‑seq技术，scEasy‑seq具有基因检出率高、RNA信息完整和建库产量高等优点，是一种高效灵敏的单细胞转录组测序技术，可以广泛应用于科学研究和疾病诊断等领域。

主权项：1.一种RNA快速建库方法，其特征在于其步骤包括：（1）提取样本中的totalRNA，采用逆转录阻碍探针法去除rRNA，同时逆转录获得一端带有P7序列的cDNA；（2）对多余的随机引物进行消解处理；（3）对cDNA进行多聚腺苷酸化，在cDNA的3’端加上polyA，采用带有3’突出末端的双链DNA接头，在cDNA的另一端接上P5序列，所述双链DNA接头的3’突出末端为一段多聚胸腺嘧啶的单链DNA序列，与cDNA的多聚腺苷酸配对，多聚胸腺嘧啶的数量为12个，polyA的数量与之匹配；（4）文库扩增及回收。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 翌圣生物科技(上海)股份有限公司 RNA快速建库方法及其应用

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