申请/专利权人：上海市农业科学院

申请日：2022-03-15

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN115044694B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12Q1/6869;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2022.09.30#实质审查的生效;2022.09.13#公开

摘要：本发明实施例公开了不结球白菜新夏青6号指纹图谱的建立方法，属于白菜技术领域，本发明提供了30对SSR引物组成的标记组合，利用PCR扩增技术和毛细管电泳检测技术对‘新夏青6号’品种进行检测，可在短时间内完成‘新夏青6号’品种鉴定与遗传多样性评价工作，具有省时、高效、快速、准确、操作方便等优点。该不结球白菜‘新夏青6号’指纹图谱的建立方法，可对‘新夏青6号’品种真伪进行有效监控，从DNA水平揭示品种的遗传变异与遗传关系，保护了农作物品种，防止假冒伪劣产品进入市场。

主权项：1.一种不结球白菜‘新夏青6号’品种的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、提取待检‘新夏青6号’品种的DNA，以引物组合中的30对SSR引物对分别对待检‘新夏青6号’品种的DNA进行PCR扩增；S2、对扩增产物进行一代测序；S3、测序的同时进行检测，根据扩增产物的相对位置，通过对不同位点的数据整合，形成‘新夏青6号’及其亲本和‘苏州青’品种的SSR指纹图谱，扩增产物读带为无时，显性标记时记录为0；扩增条件为有时，显性标记记录为1；条带较弱或无法判断基因型时记录为是否正确，无效条带记录为--；共显性标记中纯合位点的等位变异大小数据记录为XX，扩增产物读带为纯合亲本1，其中X为该位点等位变异的大小；纯合位点的等位变异大小数据记录为YY，扩增产物读带为纯合亲本2，Y为该位点等位变异的大小；杂合位点的等位变异数据记录为XY，扩增产物为双亲带型，其中X、Y为该位点上两个不同的等位变异；条带较弱或无法判断基因型时记录为是否正确，无效等位变异的大小记录为--；上述“”前为小片段，“”后为大片段；其中，还包括引物编号-引物名称，引物编号-引物名称分别为SA000189-cnu_m139a、SA000190-nia_m086a、SA000191-nia_m098a、SA000192-nia_m138a、SA000193-cnu_m046a、SA000194-nia_m121a、SA000195-cnu_m073a、SA000196-cnu_m288a、SA000197-cnu_m316a、SA000198-cnu_m327a、SA000199-nia_m101a、SA000200-cnu_m252a、SA000201-Na10-D09、SA000202-cnu_m289a、SA000203-cnu_m442a、SA000204-cnu_m050a、SA000205-cnu_m149a、SA000206-nia_m037a、SA000207-nia_m049a、SA000208-cnu_m182a、SA000209-cnu_m295a、SA000210-cnu_m090a、SA000211-cnu_m537a、SA000212-cnu_m016a、SA000213-cnu_m530a、SA000214-cnu_m534a、SA000215-nia_m022a、SA000216-nia_m038a、SA000217-ENA2、SA000218-nia_m035a；引物组合由以下30对特异性引物对组成，其为SEQIDNO.1-2、SEQIDNO.3-4、SEQIDNO.5-6、SEQIDNO.7-8、SEQIDNO.9-10、SEQIDNO.11-12、SEQIDNO.13-14、SEQIDNO.15-16、SEQIDNO.17-18、SEQIDNO.19-20、SEQIDNO.21-22、SEQIDNO.23-24、SEQIDNO.25-26、SEQIDNO.27-28、SEQIDNO.29-30、SEQIDNO.31-32、SEQIDNO.33-34、SEQIDNO.35-36、SEQIDNO.37-38、SEQIDNO.39-40、SEQIDNO.41-42、SEQIDNO.43-44、SEQIDNO.45-46、SEQIDNO.47-48、SEQIDNO.49-50、SEQIDNO.51-52、SEQIDNO.53-54、SEQIDNO.55-56、SEQIDNO.57-58、SEQIDNO.59-60；所述‘新夏青6号’及其亲本和‘苏州青’的指纹图谱如下： 和 和 和 和 上述A1指代‘新夏青6号’亲本之一19-1P-603，B指代‘苏州青’，A2指代‘新夏青6号’亲本之二19-1P-604，C指代‘新夏青6号’。

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权利要求：

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