申请/专利权人：浙江理工大学

申请日：2021-06-22

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN113447646B

主分类号：G01N33/535

分类号：G01N33/535;G01N33/539;G01N21/78

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2021.10.22#实质审查的生效;2021.09.28#公开

摘要：本发明涉及免疫学及免疫检测技术领域，公开了一种利用C‑SiO2吸附材料加速ELISA检测过程的方法，具体为利用C‑SiO2吸附材料的良好吸附性和强机械性能，分散、吸附抗原、抗体分子，提高抗原（或抗体）与固相载体的吸附速率，增加抗原、抗体分子的接触概率，减少抗原（或抗体）与固相载体的包被时间和抗原与对应抗体的反应时间，起到加速ELISA技术的作用。这种方法操作简单，不影响反应结果，且能加快ELISA技术检测的速率，为科研实验和检验测试提供便利。

主权项：1.一种利用C-SiO2吸附材料加速ELISA检测过程的方法，其特征在于包括如下步骤：步骤1：将含碳物质经球磨机粉碎干燥后过筛，放入容器中并加入去离子水超声分散，混合均匀后室温放置过夜，使其充分浸渍；所述含碳物质和去离子水的固液比为（1-2g）：（10-20mL；超声时间为10-30min；步骤2：充分浸渍后，向容器中逐滴滴加四氯化硅，同时不断搅拌；将所得混合物继续搅拌并室温放置，使其充分反应；取出后抽滤多次，并用蒸馏水冲洗滤渣至无氯离子残留；含碳物质和滴加的四氯化硅的固液比为（4-5g）：（3-4mL）；控制加料时间在1-2h内；步骤3：将步骤2所得滤渣在马弗炉中保持200-300℃活化0.5-3h，取出后充分干燥，得到C-SiO2吸附材料；步骤4：称取步骤3制备得到的C-SiO2吸附材料两份，分别放置于两个容器中，分别向容器中加入抗原、抗体对应缓冲液，振荡使其充分溶解，得到含C-SiO2吸附材料的稀释液；每份C-SiO2吸附材料为0.8-1.2g，每个容器中加入抗原或抗体对应缓冲液80-120mL；步骤5：在配制好ELISA所需的抗原、抗体溶液中，分别加入对应的、步骤4所得的含C-SiO2吸附材料的稀释液，振荡使其充分溶解；抗原、抗体溶液与步骤4所得的含C-SiO2吸附材料的稀释液混合比分别为1：1-2.5；步骤6：ELISA过程中，向酶标板中加入抗原或抗体与C-SiO2的混合物在1-5℃下包被1-3h；除去孔中液体，并用洗涤液洗涤多次；加入封闭液后放置于35-40℃烘箱中孵育0.5-1.5h；除去孔中液体，并用洗涤液洗涤多次；滴加对应抗体或抗原C-SiO2的混合物后置于35-40℃烘箱中20-40min；再次除去孔中液体，并用洗涤液洗涤多次；每孔加入TMB显色剂遮光反应5-15min后滴加终止液，10-20min内在450nm波长处测定各孔的OD值。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江理工大学 一种利用C-SiO₂吸附材料加速ELISA检测过程的方法

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