申请/专利权人：河北医科大学第一医院

申请日：2021-09-01

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN113832183B

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;C12N15/113;C12N15/89;A01K67/0276;A61K49/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2022.01.11#实质审查的生效;2021.12.24#公开

摘要：本发明提供了一种扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型的构建方法及应用。其通过动物Npr1基因特异性敲除的方式构建扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型。利用CRISPRCas技术进行动物Npr1基因的特异性敲除，包括以下步骤：（a）靶序列测序：对动物的靶位点序列进行PCR扩增并测序验证；（b）根据Npr1基因靶序列设计一对相应的sgRNA序列；（c）将Cas9sgRNA显微注射到动物的受精卵中，培育获得F0代动物，将阳性F0代动物与野生型动物交配获得具有稳定基因型的F1代动物，并检测其基因型。本发明基于Npr1+‑小鼠，构建扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型，模型构建简单，成模率高，易于操作。

主权项：1.一种扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型的构建方法，其特征是，基于Npr1+-小鼠通过动物Npr1基因特异性敲除的方式构建扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型；利用CRISPRCas技术特异性敲除动物Npr1基因的1号外显子，包括以下步骤：（a）靶序列测序：对动物的靶位点序列进行PCR扩增并测序验证；（b）根据Npr1基因靶序列设计一对相应的sgRNA序列，所述sgRNA序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.12所示；（c）将Cas9sgRNA显微注射到动物的受精卵中，培育获得F0代动物，将阳性F0代动物与野生型动物交配获得具有稳定基因型的F1代动物，并检测其基因型，基因型为Npr1+-的动物即为扩张性心肌病伴心肾综合征动物模型；所述动物为C57BL6N小鼠。

全文数据：

权利要求：

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