申请/专利权人：贵州医科大学

申请日：2023-12-14

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737191A

主分类号：C12Q1/34

分类号：C12Q1/34;G01N21/64

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种检测SARS‑CoV‑2nsp13的体外活性荧光筛选法，利用QuantiFluordsDNA染料对dsDNA染色产生荧光信号的原理，设计了一种最佳的荧光方法，用于SARS‑CoV‑2病毒蛋白的体外活性检测，可用于通过靶向nsp13解旋酶发现RNA病毒的特异性抗病毒药物；S1：将短链DNA和淬火链分别在以1:1.1的比例退火，制备得到解旋酶dsDNA底物；S2：使用HTSassaybuffer缓冲液稀释nsp13解旋酶蛋白，将解旋酶dsDNA底物加入管中反应，在双链被nsp13解旋酶解绕后，随后加入QuantiFluordsDNA染料混合物，并检测其荧光强度，通过判断荧光信号的强弱，筛选SARS‑CoV‑2nsp13解旋酶的小分子抑制剂。这样的方法可应用于SARS‑CoV‑2nsp13解旋酶小分子抑制剂的筛选，具有微型化、自动化、快速可靠等特点，适用于高通量的应用，也可应用于新型SARS‑CoV‑2nsp13解旋酶活性检测试剂盒的开发和开展。

主权项：1.一种检测SARS-CoV-2nsp13的体外活性荧光筛选法，其特征在于：利用QuantiFluordsDNA染料对dsDNA染色产生荧光信号的原理，设计了一种最佳的荧光方法，用于SARS-CoV-2病毒蛋白的体外活性检测，可用于通过靶向nsp13解旋酶发现RNA病毒的特异性抗病毒药物，具体包括以下步骤：S1：将短链DNA和淬火链分别在以1:1.1的比例退火，制备得到解旋酶dsDNA底物；S2：使用HTSassaybuffer缓冲液稀释nsp13解旋酶蛋白，将解旋酶dsDNA底物加入管中反应，在双链被nsp13解旋酶解绕后，随后加入QuantiFluordsDNA染料混合物，并检测其荧光强度，通过判断荧光信号的强弱，筛选SARS-CoV-2nsp13解旋酶的小分子抑制剂。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 贵州医科大学 一种检测SARS-CoV-2 nsp13的体外活性荧光筛选法

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