申请/专利权人：河南农业大学

申请日：2023-12-22

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737026A

主分类号：C12N9/10

分类号：C12N9/10;C12N15/82;C12N15/54

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本申请属于小麦基因工程技术领域，具体涉及GGPPS定向突变蛋白专利申请事宜。所述GGPPS突变蛋白，与现有如SEQIDNo.1所示小麦GGPPS蛋白氨基酸序列相比，其213位点和或269位点发生了单位点或双位点突变。本基于组合活性中心饱和突变策略CAST，结合计算机技术对蛋白结构信息的深入模拟，通过对酶蛋白结构与底物相互作用的氨基酸残基的模拟改造，以及通过相关突变体库的构建和筛选，最终实现了对GGPPS结构的进一步优化。基于相关验证实验，不仅证实了相关分析筛选结果的正确性，同时也为进一步的基于基因工程技术的小麦新品种培育奠定了良好的技术基础，同时也为其他作物改良提供了借鉴和参考。

主权项：1.与小麦籽粒中类胡萝卜素含量相关的GGPPS突变蛋白，其特征在于，所述GGPPS突变蛋白，与现有如SEQIDNo.1所示小麦GGPPS蛋白氨基酸序列相比，其213位点和或269位点发生了单位点或双位点突变；所述单位点突变，包括两种类型：对于213位点：对GGPPS酶结构分析表明，由于213位点位于酶的“催化口袋处”，原213位点的缬氨酸Val突变为丙氨酸Ala、半胱氨酸Cys或者苏氨酸Thr后，有利于底物与酶活口袋的结合；即：单位点突变蛋白GGPPS-213的213位点为丙氨酸Ala、半胱氨酸Cys或者苏氨酸Thr；对于269位点：对GGPPS酶结构分析表明，由于269位点位于酶分子表面，原269位点的赖氨酸Lys突变为甲硫氨酸Met、天冬酰胺Asn、谷氨酰胺Glu或精氨酸Arg后，有利于形成GGPPS同源二聚体；即：单位点突变蛋白GGPPS-269的269位点为甲硫氨酸Met、天冬酰胺Asn、谷氨酰胺Glu或者为精氨酸Arg；所述双位点突变，为213位点和269位点同时发生突变；其中原213位点的缬氨酸Val突变为丙氨酸Ala、半胱氨酸Cys或者苏氨酸Thr，同时，原269位点的赖氨酸Lys突变为甲硫氨酸Met、天冬酰胺Asn、谷氨酰胺Glu或精氨酸Arg。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南农业大学 与小麦籽粒中类胡萝卜素含量相关的GGPPS突变蛋白

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