申请/专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117551699B

主分类号：C12N15/869

分类号：C12N15/869;A61K39/12;A61K39/145;A61P31/14;A61P31/16;C12N7/01;C12N15/40;C12N15/44;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.13#公开

摘要：本发明提供了一种重组火鸡疱疹病毒rHVT‑HA‑VP2的构建方法。该方法是通过在H9亚型禽流感病毒HA蛋白表达框的两侧添加不同的间隔序列，以及在鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白表达框的下游添加另一间隔序列，然后分别插入到火鸡疱疹病毒的特定位置实现的。未添加间隔序列的重组毒在体外连续传代9代以上，即发生重组毒不稳定现象，而添加间隔序列之后的重组病毒在体外连续传代20代以上仍然稳定，HA蛋白和VP2蛋白均能够正常表达。本发明的重组病毒rHVT‑HA‑VP2制备的疫苗能够提供针对IBDV强毒和H9N2亚型禽流感病毒感染的保护，具有良好的市场应用前景。

主权项：1.一种重组火鸡疱疹病毒rHVT-HA-VP2的构建方法，其特征在于，所述构建方法是在火鸡疱疹病毒基因组中插入H9亚型禽流感病毒HA基因的表达盒、鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的表达盒和间隔序列；所述构建方法包括以下步骤：1）在H9亚型禽流感病毒HA基因表达盒的左右两侧，分别插入间隔序列1和间隔序列2；2）在鸡传染性法氏囊病毒VP2基因表达盒的下游插入间隔序列3；3）将步骤1）和2）的产物插入火鸡疱疹病毒，构建重组火鸡疱疹病毒rHVT-HA-VP2；所述H9亚型禽流感病毒HA基因的表达盒左侧插入的间隔序列1如SEQIDNO:1所示；所述H9亚型禽流感病毒HA基因的表达盒右侧插入的间隔序列如SEQIDNO:2所示；所述鸡传染性法氏囊病毒VP2基因表达盒下游插入的间隔序列3如SEQIDNO:3所示；步骤3）所述的步骤1）的产物插入位点为火鸡疱疹病毒FC-126基因组上HVT053和HVT054之间；步骤3）所述的步骤2）的产物插入位点为火鸡疱疹病毒FC-126基因组上HVT088基因内。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津瑞普生物技术股份有限公司 一种重组火鸡疱疹病毒rHVT-HA-VP2的构建方法

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