申请/专利权人：镜像绮点(上海)细胞技术有限公司

申请日：2024-01-31

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN117757749A

主分类号：C12N5/09

分类号：C12N5/09;C12N5/071

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.03.26#公开

摘要：本发明公开了一种肾癌原代细胞的培养基及培养方法，该肾癌原代细胞培养基由初始培养基、ROCK抑制剂、烟酰胺、抗生素、胰岛素、非必需氨基酸、B27、谷氨酰胺、胎牛血清、以及特异性添加因子构成。由本发明提供的肾癌原代细胞的培养基及培养方法可以提高原代肾癌细胞培养的成功率，成功率达到90％以上；保证体外原代培养的肾癌细胞能够再现原代细胞来源病人的病理表型和异质性；所培养的原代肾癌细胞不受成纤维细胞、脂肪细胞等间质细胞的干扰，能得到纯化的肾癌细胞；扩增原代肾癌细胞效率高，只要有104级别的细胞数量就可在两周左右时间内成功扩增出106数量级的肝癌细胞，扩增出的肝癌细胞还可以连续传代。

主权项：1.一种肾癌原代细胞培养基，其特征在于：由初始培养基、ROCK抑制剂、烟酰胺、抗生素、胰岛素、非必需氨基酸、B27、谷氨酰胺、胎牛血清、以及特异性添加因子构成；所述初始培养基选自GGT551、DMEMF12和RPMI-1640培养基；所述ROCK抑制剂为Y-27632，所述Y-27632的浓度范围为5～20uM；所述烟酰胺的浓度范围为5～40uM；所述抗生素包括青霉素和链霉素，所述青霉素和链霉素的浓度范围均为20～200μgmL；所述胰岛素的浓度范围均为2～30μgmL；所述非必需氨基酸的总浓度范围为30～400μM；所述B27相对于培养基的体积比为1:10～1:200；所述谷氨酰胺的浓度范围为0.1～10mM；所述胎牛血清相对于培养基的体积比为1:5～1:20；所述特异性添加因子的浓度范围为10～100ngml。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 镜像绮点(上海)细胞技术有限公司 一种肾癌原代细胞的培养基及培养方法

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