申请/专利权人：江南大学

申请日：2023-12-07

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN117757750A

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C12N15/85;C12N15/54;C12N15/12;C12N15/62;C12N9/10;C07K14/47

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开

摘要：本发明公开了一种表达Tn抗原修饰的癌抗原125肽细胞的构建方法，包括，通过CRISPRCas9基因敲除技术，在人胚胎肾细胞293HEK293O糖基化路径中敲除先后敲除编码核心1β1‑3‑半乳糖基转移酶1基因C1GALT1，编码CMP‑唾液酸转运蛋白基因SLC35A1，构建了能在细胞中稳定生产表达Tn抗原表位的敲除细胞株；在敲除细胞株中表达GPI锚定膜结合型的CA125糖肽，并进一步敲除GPI合成路径中的后GPI附着蛋白因子2基因PGAP2，使得稳定过表达的GPI锚定CA125转为可溶形式分泌至培养基中；最后利用流式分析以及蛋白质印迹法，验证了相比于野生型HEK293细胞株所生产的CA125，敲除细胞株所生产的CA125主要携带Tn糖抗原修饰。

主权项：1.一种生产以Tn抗原修饰为主的糖肽的动物细胞株，其特征在于：包括，所述Tn抗原为单个N-乙酰葡糖胺修饰在O糖基化修饰位点丝氨酸苏氨酸上；所述动物细胞株为C1GALT1-SLC35A1基因双敲除细胞株CS-KO高表达CA125肽后敲除基因PGAP2后最终得到C1GALT1-SLC35A1-PGAP2-KO三基因敲除细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江南大学 一种生产以Tn抗原修饰为主的糖肽的动物细胞株及其构建方法

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