申请/专利权人:浙江工业大学
申请日:2024-01-03
公开(公告)日:2024-03-26
公开(公告)号:CN117757713A
主分类号:C12N1/21
分类号:C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/52;C12P13/04;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开
摘要:本发明涉及生物工程技术领域,尤其涉及一种不依赖β‑丙氨酸添加的高产D‑泛酸基因工程菌、构建方法及应用。本发明运用基因编辑技术,在现有工程菌的基础上进一步强化D泛酸生物生成途径中关键酶的表达水平以及β‑丙氨酸生物生成途径中关键酶的表达水平,得到了一株发酵过程中不添加β‑丙氨酸的高产菌株。本发明所有菌株中摇瓶效价最高达到2.97gL,相比出发菌株,在发酵过程中省去了外源β‑丙氨酸的添加,大大节约了发酵成本,简化了发酵流程,适合于大规模工业化生产应用。此外,本发明产D‑泛酸的基因工程菌ZPA18在摇瓶发酵中泛酸产量提高至3.34gL,5L发酵罐补料发酵83h后产量达到46.15gL。
主权项:1.一种不依赖β-丙氨酸添加的高产D-泛酸基因工程菌,其特征在于,由如下方法构建获得:以菌株E.coliW3110Trc-panCTrc-panETrc-panBTrc-ilvCilvG*△avtAilvE*coaA*ilvA*Trc-lpd△glk为底盘菌株,将来源于谷氨酸棒状杆菌的panB基因整合至其基因组中的假基因ycjV位点,并将来源于枯草芽孢杆菌的panD基因,来源于谷氨酸棒状杆菌的aspB基因和pyc基因在底盘菌中过表达,从而获得所述高产D-泛酸基因工程菌。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江工业大学 一种不依赖β-丙氨酸添加的高产D-泛酸基因工程菌、构建方法及应用
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