申请/专利权人：瀚晖制药有限公司

申请日：2023-12-15

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN117756914A

主分类号：C07K14/62

分类号：C07K14/62;C07K1/107

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开

摘要：本发明涉及胰岛素技术领域，尤其是涉及一种依柯胰岛素的制备方法，包括如下步骤：a将固相包涵体进行变性、复性、酶切，得到胰岛素前体；b在胰岛素前体上连接脂肪酸侧链，制备得到依柯胰岛素；变性缓冲液为含8～12mMNaHCO3和0.1～1.2mM的EDTA的水溶液；复性缓冲液为pH为8.9～9.1的、含22～28mM甘氨酸和5～25mMTris的水溶液。本发明通过对依柯胰岛素的制备过程中的变性和复性的条件进行改变，降低了变复性的成本、环保压力和能耗，同时缩短复性时间和保证了收率。

主权项：1.依柯胰岛素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a将固相包涵体进行变性、复性、酶切，得到胰岛素前体；b在所述胰岛素前体上连接脂肪酸侧链，制备得到依柯胰岛素；其中，所述变性处理包括：将所述固相包涵体加入变性缓冲液中，并调节pH至11.9～12.1，搅拌使包涵体溶解；再加入β-巯基乙醇，室温下，搅拌反应30min以上，得到变性溶液；所述复性处理包括：将所述变性溶液与4～9倍体积的复性缓冲液混合，然后加入硫酸铜溶液，于16～24℃、pH为9.2～9.3的条件下，搅拌复性2h以上；所述变性缓冲液为含8～12mMNaHCO3和0.1～1.2mM的EDTA的水溶液；所述复性缓冲液为pH为8.9～9.1的、含22～28mM甘氨酸和5～25mMTris的水溶液。

全文数据：

权利要求：

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