申请/专利权人：湖北大学

申请日：2023-12-12

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117778348A

主分类号：C12N9/12

分类号：C12N9/12;C12N15/54;C12N15/10;C12Q1/6851

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明公开了一种具有逆转录酶活性的PfuDNA聚合酶突变体及其应用，所述PfuDNA聚合酶突变体包括K467RF588LW769R、R382HR385HV390I、I38LR97M、E665KE735K、K118IN713V，其中K118IN713V逆转录活性最强。同时，本发明的PfuDNA聚合酶突变体还保留了野生型酶的聚合酶活性，相较于常规逆转录酶较低的保真性，突变体本身的校准活性使其具备高保真性，加之高耐热性，使其能够以RNA为底物高效、高保真地生成cDNA，继而在标准PCR反应条件下扩增该cDNA，全过程无需额外添加逆转录酶，实现单酶“一步法”RT‑PCR。

主权项：1.一种具有逆转录酶活性的PfuDNA聚合酶突变体，其特征在于，所述PfuDNA聚合酶突变体为以下任一：K467RF588LW769R突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第467位的赖氨酸突变为精氨酸，同时将第588位的苯丙氨酸突变为亮氨酸，将第769位的色氨酸突变为精氨酸；或R382HR385HV390I突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第382位和385位的精氨酸突变为组氨酸，同时将第390位的缬氨酸突变为异亮氨酸；或I38LR97M突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第38位的异亮氨酸突变为亮氨酸，同时将第97位的精氨酸突变为蛋氨酸；或E665KE735K突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第665位和735位的谷氨酸同时突变为赖氨酸；或K118IN713V突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第118位的赖氨酸突变为异亮氨酸，同时将第713位的天冬酰胺突变为缬氨酸。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 湖北大学 一种具有逆转录酶活性的Pfu DNA聚合酶突变体及其应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD