申请/专利权人：熙甜(上海)生物科技有限公司

申请日：2024-01-10

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887709A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C12N15/61;C12N9/90;C12N15/70;C12Q1/6813;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.16#公开

摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体为一种随机改变基因DNA序列的基因杂交方法。本发明将不同来源且具有高同源性的基因DNA序列随机拼接进行杂交，得到大量不同于原始序列的全新序列，再将全新序列构建至载体上进行表达后筛选，得到更高效率的酶。具体包括在基因库中找出不同物种中相同功能的氨基酸序列，通过计算机辅助选出具有高度同源性的氨基酸序列进行分析后优化密码子；以优化的DNA序列为模板进行设计，在每条模板上连续拉出多条寡核苷酸序列，把每条模板都分割成为多条寡核苷酸，分别合成每条寡核苷酸；进行两轮PCR，将产物进行分子克隆转化进入大肠杆菌中，获得大量含有全新基因序列的转化子，挑出所有转化子后进行测序。

主权项：1.一种随机改变基因DNA序列的杂交方法，其特征在于，具体步骤为：是将不同来源且具有高同源性的相同功能基因的DNA序列随机拼接进行杂交后，得到大量不同于原始序列的全新的序列，再将得到的全新序列构建至载体上进行表达后筛选，得到更高效率的酶，具体步骤为：1在基因库中找出不同物种中相同功能的氨基酸序列，通过计算机辅助选出具有高度同源性的氨基酸序列进行分析后优化密码子；2然后分别在每条优化之后的DNA序列两端加上相同的上游引物和下游引物，以优化之后的DNA序列为模板进行设计，在每条模板上连续拉出多条寡核苷酸序列，每条寡核苷酸序列长度在60bp以内，这样把每条模板都分割成为多条寡核苷酸，分别合成每条寡核苷酸；3取所有寡核苷酸各1μl混合，使用高保真Taq酶进行第一轮PCR，在第一轮PCR中，不同来源的寡核苷酸片段之间由于有较高的同源性随机拼接起来生成全新的模板；以第一轮PCR产物为模板，以两端相同的序列为引物进行第二轮PCR，将第二轮PCR产物进行分子克隆转化进入大肠杆菌中，从而获得大量含有全新基因序列的转化子，挑出所有的转化子后进行测序。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 熙甜(上海)生物科技有限公司 一种随机改变基因DNA序列的基因杂交方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD