申请/专利权人:华南农业大学
申请日:2022-03-29
公开(公告)日:2024-03-29
公开(公告)号:CN114805600B
主分类号:C07K19/00
分类号:C07K19/00;C12N15/62;C12N15/866;A61K39/135;A61K39/12;A61P31/14;A61P31/20
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.29#授权;2022.08.16#实质审查的生效;2022.07.29#公开
摘要:本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.5、SEQIDNo.6或SEQIDNo.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗,免疫BALBc雌鼠后,可诱导机体产生特异性免疫反应,能有效预防PCV2d和FMDV的感染,对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
主权项:1.一种猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs,其特征在于,由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的重组蛋白组装而成,所述重组蛋白由猪圆环2d型Cap蛋白嵌合如下猪O型口蹄疫病毒抗原表位组合后得到;所述猪O型口蹄疫病毒抗原表位为B细胞表位第129~160位氨基酸与T细胞表位第16~44位氨基酸串联,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.7所示,其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示;所述VLPs采用如下方法制备得到:将所述编码基因克隆至双启动子pFastBacTMDual表达载体中得到转移载体,将转移载体转化至感受态细胞DH10Bac,获得重组病毒质粒,再转染sf9单层昆虫细胞,培养后获得重组杆状病毒,将重组杆状病毒感染到悬浮培养的High-Five昆虫细胞表达重组蛋白,扩大培养后,收集目的蛋白,采用蔗糖梯度离心纯化,即得所述VLPs。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 华南农业大学 猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs及其制备方法与应用
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