申请/专利权人:南昌大学
申请日:2021-11-29
公开(公告)日:2024-03-29
公开(公告)号:CN114181834B
主分类号:C12N1/02
分类号:C12N1/02;C12R1/445
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.29#授权;2022.04.01#实质审查的生效;2022.03.15#公开
摘要:本发明公开了一种聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子快速富集分离金黄色葡萄球菌的方法,属于生物技术领域。本发明方法包括磁性纳米粒子与聚乙烯亚胺进行偶联、聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子复合物捕获样品液中的目的菌,通过外加磁场的作用,将被捕获目标菌与样品液进行分离及重悬等步骤。本发明通过磁分离捕获到的目的菌可以直接进行后续分析;与传统的细菌磁分离方法相比,本发明方法可以对食品基质中的大部分细菌进行磁分离,不仅提高了样品中金黄色葡萄球菌分离效率,同时也降低了成本。
主权项:1.聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子快速富集分离金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:1将磁性纳米粒子洗涤后重悬于无菌PBS溶液中;2将EDC和NHSS分别溶解于无菌PBS溶液,然后加入至步骤1所得溶液,室温条件下活化1h,将活化后的磁性纳米粒子再次洗涤重悬;3将聚乙烯亚胺溶于无菌PBS溶液,然后加入至步骤2活化后再次洗涤的磁性纳米粒子溶液,反应4h,所得反应产物洗涤重悬后得到聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子复合物;所述聚乙烯亚胺为支链化,其分子量为5000Da;4将步骤3制备得到的聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子复合物加入至含金黄色葡萄球菌的溶液中,37℃条件下以180rpm混匀孵育2min,然后插入磁力架分离3min,分离产物洗涤后重悬即得金黄色葡萄球菌-聚乙烯亚胺-磁性纳米粒子复合物。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南昌大学 聚乙烯亚胺修饰的磁性纳米粒子快速富集分离金黄色葡萄球菌的方法
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