申请/专利权人:丹娜(天津)生物科技股份有限公司
申请日:2023-12-26
公开(公告)日:2024-04-02
公开(公告)号:CN117467804B
主分类号:C12Q1/70
分类号:C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11;C12N15/113;C12R1/93
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.02#授权;2024.02.20#实质审查的生效;2024.01.30#公开
摘要:本发明公开了一种用于呼吸道合胞病毒核酸快速检测的引物及其应用。所述引物的核酸序列包括SEQIDNO.1和SEQIDNO.2或SEQIDNO.1和SEQIDNO.3所示的序列中的任意一组。本发明创造性地设计了用于呼吸道合胞病毒核酸快速检测的引物,采用RT‑ERA结合CRISPRCas12a检测体系,靶向RSVN基因,可同时检测A型及B型RSV,可在恒温下完成核酸扩增及检测,检测灵敏度更高,特异性更强,不需要专业的仪器设备及操作人员,便于推广。
主权项:1.一种非疾病诊断目的的检测呼吸道合胞病毒核酸的方法,其特征在于,所述方法包括:对待测样本的DNA进行重组酶聚合酶恒温扩增,配制CRISPRCas12a检测体系,然后进行实时荧光定量PCR检测;所述恒温扩增的引物核酸序列如SEQIDNO.1-3所示;所述CRISPRCas12a检测体系包括特异性sgRNA,所述特异性sgRNA由sgRNA1和sgRNA2组成,所述sgRNA1由sgDNA1体外转录得到,所述sgRNA2由sgDNA2体外转录得到,所述sgDNA1的核酸序列如SEQIDNO.6所示,所示sgDNA2的核酸序列如SEQIDNO.7所示;所述恒温扩增的反应体系包括:RT-ERA扩增反应试剂、RT-ERA反应Buffer和醋酸镁;所述CRISPRCas12a检测体系还包括:Cas12a酶、ssDNAreporter、Cas12a检测Buffer和无核酸酶水。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 丹娜(天津)生物科技股份有限公司 一种用于呼吸道合胞病毒核酸快速检测的引物及其应用
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