申请/专利权人：北京化工大学

申请日：2021-09-01

公开（公告）日：2024-04-23

公开（公告）号：CN113564282B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.23#授权;2021.11.16#实质审查的生效;2021.10.29#公开

摘要：本发明公开了一种集核酸提取和LAMP扩增于一体的可视化检测病毒的方法。该方法包括如下步骤：将待测样本在高浓度胍盐溶液中释放核酸并被硅羟基磁珠捕获；向捕获了病毒核酸的硅羟基磁珠中加入进行LAMP的试剂，得到LAMP体系；进行LAMP反应，根据溶液颜色变化判断待测样本是否含有病毒。该方法具有如下优点：磁珠吸附的核酸无需洗脱，可直接加入LAMP混合液进行扩增，同时借助苯酚红显色，只需恒温加热30min，即可可视化读取检测结果；整个检测流程操作简便快速，在35min内即可实现核酸提取到结果读取；检测灵敏度高。本发明对病毒尤其是具有较强传染性和或潜在危险的病毒的检测具有重要的应用价值。

主权项：1.一种集核酸提取和LAMP扩增于一体的可视化检测病毒的方法，依次包括如下步骤：（1）将待测样本在高浓度胍盐溶液中释放核酸并被硅羟基磁珠捕获；（2）向捕获了病毒核酸的硅羟基磁珠中加入进行LAMP的试剂，得到LAMP体系；所述进行LAMP的试剂包括进行LAMP的反应液、用于检测病毒的LAMP引物组和酸碱指示剂；（3）进行LAMP反应，之后观察溶液颜色变化：如果溶液颜色变色，则待测样本含有病毒，否则待测样本不含有病毒；所述步骤（1）依次包括如下步骤：（1-1）将裂解液和硅羟基磁珠混合均匀，裂解液和硅羟基磁珠的体积质量比为1ml:（0.8-1.2）mg；（1-2）加入与裂解液等体积的待测样本，混合均匀，静置2min以上；（1-3）通过磁分离捕获磁珠；（1-4）用乙醇溶液洗涤磁珠，之后干燥；所述裂解液的溶质及其浓度为4-6M盐酸胍、1-3MNaCl、2.0-3.0mMEDTA和18-22mMTris，溶剂为超纯水，pH值为4.8-5.2；所述方法用于非疾病的诊断与治疗。

全文数据：

权利要求：

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