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【发明公布】一种外泌体总RNA的提取方法_上海思路迪生物医学科技有限公司_202211208279.3 

申请/专利权人:上海思路迪生物医学科技有限公司

申请日:2022-09-30

公开(公告)日:2024-04-09

公开(公告)号:CN117844798A

主分类号:C12N15/10

分类号:C12N15/10

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要:本发明公开了一种外泌体总RNA的提取方法。该方法为:步骤1,向重悬的外泌体中加入QIAzol混匀,室温孵育4‑6min,加入氯仿混匀,其中氯仿和QIAzol的体积比为0.15‑0.25:1,室温孵育3‑5min;离心,将上层水相转移到新的离心管中,加入1.4‑1.6倍体积的酒精,充分混匀;步骤2,吸取混匀液到离心柱中,离心,直到所有混匀液通过离心柱;步骤3,加入BufferRWT,离心,加入RPE,其中RPE和BufferRWT的体积比为0.5‑1:1,离心,弃离心废液;步骤4,加入78‑85%酒精,离心,弃离心废液,将离心柱转入新的收集管中,离心;将离心柱转入新的离心管中,向离心柱膜加入无酶水,孵育1‑2min,离心1‑2min,收集RNA样本。本发明提供的方法用于外泌体RNA提取时具有更好的提取效果。

主权项:1.一种外泌体总RNA的提取方法,其特征在于,所述方法的步骤如下:步骤1,向重悬的外泌体中加入QIAzol混匀,室温孵育4-6min,加入氯仿混匀,其中氯仿和QIAzol的体积比为0.15-0.25:1,室温孵育3-5min;离心,将上层水相转移到新的离心管中,加入1.4-1.6倍体积的酒精,充分混匀;步骤2,吸取混匀液到离心柱中,离心,直到所有混匀液通过离心柱;步骤3,加入BufferRWT,离心,加入RPE,其中RPE和BufferRWT的体积比为0.5-1:1,离心,弃离心废液;步骤4,加入78-85%酒精,离心,弃离心废液,将离心柱转入新的收集管中,离心;将离心柱转入新的离心管中,向离心柱膜加入无酶水,孵育1-2min,离心1-2min,收集RNA样本。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海思路迪生物医学科技有限公司 一种外泌体总RNA的提取方法

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