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【发明公布】使用内部对照的定量PCR法_株式会社岛津制作所;日本技术服务有限公司_202280057945.X 

申请/专利权人:株式会社岛津制作所;日本技术服务有限公司

申请日:2022-08-23

公开(公告)日:2024-04-09

公开(公告)号:CN117858961A

主分类号:C12Q1/686

分类号:C12Q1/686;C12Q1/6848

优先权:["20210827 JP 2021-138596"]

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要:本发明的检体中的DNA的定量方法包括下述工序:向包含检体的第一容器和包含已知量的标准DNA的第二容器中分别添加PCR缓冲液并进行PCR的工序,所述第一容器和所述第二容器中分别添加的所述PCR缓冲液包含相同拷贝数的内部对照DNA、所述检体中的DNA和所述标准DNA的扩增用PCR引物对、所述内部对照DNA的扩增用PCR引物对、所述检体中的DNA和所述标准DNA的检测用寡核苷酸荧光标记探针、所述内部对照DNA的检测用寡核苷酸荧光标记探针、和DNA聚合酶;比较所述PCR中针对第一容器和第二容器中所含的所述内部对照DNA的Ct值并测定所述Ct值间的差的工序;基于所述Ct值间的差校正针对所述第一容器中所含的检体中的DNA的Ct值的工序;和根据基于所述第二容器中所含的标准DNA量制作出的标准曲线和经所述校正的Ct值测定检体中的DNA量的工序。由此,能够更准确地定量检体中的目标DNA。

主权项:1.一种检体中的DNA的定量方法,其包括下述工序:向包含检体的第一容器和包含已知量的标准DNA的第二容器中分别添加PCR缓冲液并进行PCR的工序,所述第一容器和所述第二容器中分别添加的所述PCR缓冲液包含相同拷贝数的内部对照DNA、所述检体中的DNA和所述标准DNA的扩增用PCR引物对、所述内部对照DNA的扩增用PCR引物对、所述检体中的DNA和所述标准DNA的检测用寡核苷酸荧光标记探针、所述内部对照DNA的检测用寡核苷酸荧光标记探针、和DNA聚合酶;比较所述PCR中针对第一容器和第二容器中所含的所述内部对照DNA的Ct值并测定所述Ct值间的差的工序;基于所述Ct值间的差校正针对所述第一容器中所含的检体中的DNA的Ct值的工序;和根据基于所述第二容器中所含的标准DNA量制作出的标准曲线和经所述校正的Ct值测定检体中的DNA量的工序。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 株式会社岛津制作所;日本技术服务有限公司 使用内部对照的定量PCR法

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