申请/专利权人：天津科技大学

申请日：2024-03-04

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844728A

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/77;C12N15/90;C12P13/08;C12R1/15

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明提供了一种L‑缬氨酸生产菌株及其构建方法与应用，通过构建辅酶平衡系统将L‑缬氨酸合成与磷酸戊糖途径和TCA循环剥离开来，利用辅酶平衡以消除对除糖酵解和L‑缬氨酸合成途径之外的代谢途径的依赖，且采用静态和动态代谢工程调控策略弱化回补途径和TCA循环，同时敲除了有机酸合成途径的关键基因，所构建菌株可以在好氧条件下高效率合成L‑缬氨酸，发酵周期短，转化率高；不携带质粒，发酵过程无需控制微氧或厌氧，从而不产生有机酸等副产物，满足高纯度L‑缬氨酸的生产要求，在氨基酸生产领域具有较为广泛的应用前景。

主权项：1.一种L-缬氨酸生产菌株，其特征在于：是以C.glutamicumrpsLK43R作为出发菌株，用启动子Ptuf表达来源于菌株谷氨酸棒杆菌XV菌株的ilvB*和ilvN*基因簇，然后在相同位点整合突变的ilvC*基因，引入球形芽孢杆菌的亮氨酸脱氢酶基因leuDH；然后对ilvB*N*C*和leuDH进行二拷贝整合表达；敲除iolR阻遏蛋白基因同时整合葡萄糖激酶基因glk1；在hdpA位点整合gapA基因；整合来自需钠弧菌的edd和eda基因；敲除ilvE、avtA、ldhA、ppc、pckA、pta、pqo基因；点突变icd基因的起始密码子为GTG稀有密码子；并进行基因组整合lrp-PbrnF-tetR、将gltA基因的启动子替换为PtetA启动子构建得到的。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津科技大学 一种L-缬氨酸生产菌株及其构建方法与应用

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