申请/专利权人：江苏大学

申请日：2021-05-31

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN113337580B

主分类号：C12Q1/6825

分类号：C12Q1/6825;C09K11/88;C09K11/02;G01N21/64

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2021.09.21#实质审查的生效;2021.09.03#公开

摘要：本发明属于适配体传感检测技术领域，涉及一种基于光致电子转移的比率荧光适配体传感器的制备方法及检测ZEN的应用；本发明具体是将N,S‑CQDs和适配体修饰的CdTeQDs‑apt产生的荧光信号分别作为参比信号和响应信号，通过利用WS2NTs和CdTeQDs‑apt之间的光致电子转移、ExoI对CdTeQDs‑apt的剪切作用以及适配体特异性结合ZEN的特性，得到基于光致电子转移的比率荧光适配体传感器，实现实际样品中ZEN的高灵敏、高精准、高选择性检测；本发明构建的传感器对ZEN的线性响应范围为0.1‑100pgmL，检测限为0.1pgmL，成功实现了ZEN的高性能分析。

主权项：1.基于光致电子转移检测玉米赤酶烯酮的比率荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于包含步骤如下：1合成氮硫双掺杂碳量子点溶液：将4.5g柠檬酸、4.5g尿素和1.125gL-半胱氨酸溶于10mL水中，形成透明的混合溶液，于微波炉中700W条件下加热5min得到深棕色固体；将10mg深棕色固体重新分散在20mL水中并在10000rpm离心15min，通过0.22μm的滤膜过滤后，得到氮硫双掺杂碳量子点溶液；2合成适配体修饰的碲化镉量子点溶液：a.前驱体溶液的制备：将0.0646gTe和0.0457gNaBH4溶于4mL水中，通氮气20min后静置于4℃下反应8h，得到前驱体溶液；b.CdTeQDs溶液的制备：在搅拌条件下，将0.1142gCdCl2·2.5H2O溶于50mL水中，加入75μL巯基丙酸，然后用1molLNaOH溶液将溶液的pH调至8.5，通氮气15min；加入2mL步骤a制备的前驱体溶液，通氮气10min后将混合溶液在100℃下回流20h，并加入等体积乙醇离心，离心条件为10000rpm离心10min，离心后得到发射波长为665nm的红色CdTeQDs，加入水中得到CdTeQDs溶液；c.适配体修饰的碲化镉量子点溶液的制备：在200μL10μMCdTeQDs溶液中加入50μL10mMPBS溶液和3770μL40mMTris-HCl溶液混合，并常温避光搅拌30min；加入40μL50μMZEN-适配体溶液，并搅拌4h后得到适配体修饰的碲化镉量子点溶液；所述PBS溶液的pH为7.4，含有10mMEDC和5mMNHS；3将步骤1制备的氮硫双掺杂碳量子点溶液和步骤2制备的适配体修饰的碲化镉量子点溶液混合，用PBS溶液调节pH后，得到比率荧光探针混合溶液A；4在步骤3制得的比率荧光探针混合溶液A中加入ZEN溶液，作用一段时间得到混合溶液B；5在步骤4制得的混合溶液B中加入大肠杆菌核酸外切酶I溶液，作用一段时间后得到混合溶液C；所述混合溶液B与大肠杆菌核酸外切酶I溶液的体积比是48:1；大肠杆菌核酸外切酶I溶液浓度为0.1UμL，作用时间为20-40min；6按比例在步骤5制得的混合溶液C中加入二硫化钨纳米片溶液，作用一段时间后得到混合溶液D，即为比率荧光适配体传感器；所述混合溶液C与二硫化钨纳米片溶液的体积比是49:1，二硫化钨纳米片溶液的浓度为0.5mgmL，作用时间为15-25min。

全文数据：

权利要求：

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