申请/专利权人:新泰市佳禾生物科技有限公司;汕头市佳禾生物科技有限公司
申请日:2021-09-30
公开(公告)日:2024-04-05
公开(公告)号:CN114085861B
主分类号:C12N15/75
分类号:C12N15/75;C12N1/21;C12N9/88;C12R1/125
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.05#授权;2022.03.15#实质审查的生效;2022.02.25#公开
摘要:本发明公开了一种精氨酸脱羧酶生产菌及其构建方法,包括以下步骤:1对Pg3启动子进行优化,将质粒pHT304用NdeⅠ和HincⅡ双酶切处理,将优化后的Pg3启动子整合在双酶切处理后的质粒pHT304上,得到质粒pHT304‑Pg3;2将步骤1得到的质粒pHT304‑Pg3用SphⅠ和SacⅠ双酶切处理,将SpeA基因整合到双酶切处理后的质粒pHT304‑Pg3上,得到重组表达载体;3将步骤2得到的重组表达载体导入到枯草芽孢杆菌上,构建得到精氨酸脱羧酶生产菌。本发明的生产菌提高了精氨酸脱羧酶的产量。
主权项:1.一种精氨酸脱羧酶生产菌的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1对Pg3启动子进行优化,将质粒pHT304用NdeⅠ和HincⅡ双酶切处理,将优化后的Pg3启动子整合在双酶切处理后的质粒pHT304上,得到质粒pHT304-Pg3;优化后的Pg3启动子,其核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;2将步骤1得到的质粒pHT304-Pg3用SphⅠ和SacⅠ双酶切处理,将SpeA基因整合到双酶切处理后的质粒pHT304-Pg3上,得到重组表达载体;所述SpeA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3中第5-1924位核苷酸所示;3将步骤2得到的重组表达载体导入到枯草芽孢杆菌上,构建得到精氨酸脱羧酶生产菌。
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