申请/专利权人：北京市农林科学院

申请日：2024-01-19

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117607464B

主分类号：G01N33/74

分类号：G01N33/74;G01N33/66;G01N33/53;C12Q1/40;C12Q1/54

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.05#授权;2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开

摘要：本发明提供了一种基于便携式血糖仪的核酸适配体传感器对孕酮的即时检测方法，其是以孕酮的核酸适配体作为特异性识别元件，通过链置换与磁分离，实现非糖靶标孕酮信号转化为血糖仪可测的葡萄糖信号；所述孕酮的核酸适配体用于结合孕酮。本发明的检测方法，将非糖靶标浓度转化为血糖仪可测的直链淀粉浓度，实现血糖仪对非糖靶标‑孕酮的即时定量检测，所用仪器仅需要不需要血糖仪，不需要其他电化学光学等检测仪器，检测成本低，操作简单，为实现现场、准确的孕酮检测，促进奶牛早孕诊断试剂盒的开发奠定基础。

主权项：1.一种基于便携式血糖仪的核酸适配体传感器对孕酮的即时检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、制备基于便携式血糖仪的核酸适配体传感器；S2、将核酸适配体传感器与待测溶液混合，反应后，经磁分离后取上清液，将上清液与直链淀粉溶液混合孵育后，进行血糖仪检测，获得待测溶液的血糖读数；S3、将孕酮标准溶液分别与核酸适配体传感器混合进行步骤S2操作，同时空白溶液做上述步骤S2的实验获得空白值；以孕酮浓度为横坐标，孕酮标准溶液的血糖仪读数与空白值的差值为纵坐标进行线性拟合，得到其线性方程即标准曲线；S4、将步骤S2获得的待测溶液的血糖读数代入标准曲线中即可获得待测溶液中孕酮的浓度；在步骤S1中，所述核酸适配体传感器的制备方法为将适配体互补链与葡萄糖淀粉酶的偶联物CS-GA与生物素修饰的核酸适配体进行第一次混合孵育后，加入链霉亲和素磁珠进行第一次震荡偶联后，用缓冲液洗涤后获得核酸适配体传感器；所述适配体互补链的序列如SEQIDNO.1所示，适配体互补链的5′端有-SH-SH-修饰；所述核酸适配体的序列如SEQIDNO.2所示，核酸适配体的5′端有Biotin修饰。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京市农林科学院 一种基于便携式血糖仪的核酸适配体传感器对孕酮的即时检测方法

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