申请/专利权人:中国海洋大学
申请日:2023-09-08
公开(公告)日:2024-04-05
公开(公告)号:CN117169205B
主分类号:G01N21/78
分类号:G01N21/78;G01N21/31;G01N21/33
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.05#授权;2023.12.22#实质审查的生效;2023.12.05#公开
摘要:本发明公开了一种基于比色生物传感器的次黄嘌呤的检测方法,属于分析检测领域。包括以下步骤:1取待测溶液样品,加入黄嘌呤氧化酶,在37℃条件下共孵育15分钟,得初步孵育液;2将初步孵育液、TMB溶液、乙酸溶液和NiPtNPs溶液混合,在37℃条件下共孵育30分钟,得孵育液;3利用比色法测定孵育液在652nm处的最大吸收值;4代入次黄嘌呤的紫外吸收标准曲线,计算得到待测溶液样品中次黄嘌呤的浓度。本发明的基于比色生物传感器的次黄嘌呤的检测方法,能够简单快速地测定出次黄嘌呤含量,准确性高,具有良好的经济价值,对水产品新鲜度监测具有重要意义。
主权项:1.一种基于比色生物传感器的次黄嘌呤的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取待测溶液样品,加入黄嘌呤氧化酶并使其浓度为0.2UmL,在37℃条件下共孵育15分钟,得初步孵育液;(2)将20μL的初步孵育液、27μL的TMB溶液、93μL的乙酸溶液和1μL的NiPtNPs溶液混合,在37℃条件下共孵育30分钟,得孵育液,其中,TMB溶液的浓度为8mM;乙酸溶液的浓度为1M,pH值为5.0;NiPtNPs溶液的粒子浓度为6.8×10-11M;所述NiPtNPs溶液是通过以下方法制备得到的:将10mg氯铂酸、7mg氯化镍、80mg聚乙烯吡咯烷酮和10mL四甘醇加入到90mL超纯水中,150℃加热30分钟;然后加入1mL的乙醛-四甘醇混合溶液,继续保持150℃加热30分钟;冷却至室温,即得NiPtNPs溶液,粒子浓度为1.4×10-9M,用超纯水稀释至粒子浓度为6.8×10-11M;所述乙醛-四甘醇混合溶液中二者的体积比为1:1;(3)利用比色法测定孵育液在652nm处的最大吸收值;(4)代入次黄嘌呤的紫外吸收标准曲线,计算得到待测溶液样品中次黄嘌呤的浓度。
全文数据:
权利要求:
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