申请/专利权人：北京百力格生物科技有限公司

申请日：2024-03-11

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866038A

主分类号：C07K1/22

分类号：C07K1/22;C07K1/18;C12N9/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明提供纯化含有宿主核酸的带亲和标签的酸性蛋白的方法，所述方法包括将含有宿主核酸的带亲和标签的酸性蛋白溶液在亲和层析柱上进行上样，用平衡溶液漂洗所述亲和层析柱；用PEI溶液漂洗所述亲和层析柱，洗脱下来的蛋白置换到低盐体系后，用阳离子层析柱进行纯化或者用阴离子层析柱进纯化。本发明在原有的亲和层析步骤中增加一步PEI漂洗，通过优化PEI漂洗浓度与体积有效解决HCD残留问题，本发明方法简单，蛋白损失小、HCD残留低且无PEI残留，同时该方法也适用于多种类型蛋白，具备可大量纯化制备，纯化效率高、成本低特点。

主权项：1.纯化含有宿主核酸的带亲和标签的酸性蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：将含有宿主核酸的带亲和标签的酸性蛋白溶液在亲和层析柱上进行上样，所述酸性蛋白与所述亲和层析柱上配基进行特异性结合；步骤2：上样完成后，用平衡溶液漂洗所述亲和层析柱；步骤3：步骤2之后，用PEI溶液漂洗所述亲和层析柱，在漂洗过程中，PEI带着核酸冲洗下来，所述酸性蛋白依然结合在所述亲和层析柱上；步骤4：步骤3之后，用平衡溶液再漂洗所述亲和层析柱，漂洗完成后用洗脱液将所述酸性蛋白从所述亲和层析柱上洗脱下来；步骤5：洗脱下来的蛋白置换到低盐体系后，用阳离子层析柱进行纯化，低盐洗脱所述酸性蛋白，或者用阴离子层析柱进纯化，低盐去除可能残留的PEI，再用高盐洗脱所述酸性蛋白，从而根据PEI与所述酸性蛋白在离子柱上的挂柱差异分离酸性蛋白和PEI，得到纯化的所述酸性蛋白。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京百力格生物科技有限公司 纯化含有宿主核酸的带亲和标签的酸性蛋白的方法

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