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【发明公布】一种藻菌共生联合独脚金内酯削减沼液中抗生素抗性基因的处理方法_嘉兴南湖学院_202410066707.6 

申请/专利权人:嘉兴南湖学院

申请日:2024-01-17

公开(公告)日:2024-04-12

公开(公告)号:CN117865358A

主分类号:C02F3/32

分类号:C02F3/32;C12N1/12;C12N1/20;C02F101/30;C12R1/01;C12R1/89

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要:本发明公开了一种藻菌共生联合独脚金内酯削减沼液中抗生素抗性基因的方法,包括以下步骤:S1:小球藻的培养;S2:小球藻内生菌的培养;S3小球藻‑小球藻内生菌的共培养;S4:将上述得到的小球藻‑小球藻内生菌共生体转移到沼液中,所述沼液中加入不同浓度的独脚金内酯GR24,然后将沼液置于一定条件下处理。本发明的独脚金内酯在浓度为10‑9M时,在沼液中对降低抗生素抗性基因的绝对丰度方面具有明显的优势,具有较大的应用潜力和市场价值。

主权项:1.一种藻菌共生联合独脚金内酯削减沼液中抗生素抗性基因的方法,其特征在于:包括以下步骤:S1:小球藻的培养:将小球藻FACHB-8利用BG-11培养基对小球藻进行扩培,扩培光照由冷白色LED灯提供,光照强度为200μmolm-2s-1,光暗比为12h:12h,扩培温度控制在25±2℃,扩培时间为7天;S2:小球藻内生菌的培养:将10mL小球藻培养液无菌转移至50mL无菌管中,离心并弃去上清液,用无菌水离心反复洗涤沉淀物;将得到的海藻泥与0.5mL无菌水混合,转移到10mL无菌玻璃研磨管中,在无菌手术台上研磨20分钟;接着,将100μL稀释液倒入LB固体培养基中,在37±1℃无光条件下培养,当600nm的光学值约为0.95时,培养结束;根据生长标准曲线,菌液约为2.0×107cellsmL,得到内生细菌S395-2;S3:小球藻-小球藻内生菌的共培养:将步骤S1得到的小球藻与步骤S2得到的内生细菌S395-2,以初始生物量比为1:10,既小球藻2.0×106cellmL:内生细菌2.0×107cellmL,在温度25±1℃、光照强度200μmol·m-2·s-1、转速160rpm、光暗比12h光照12h黑暗进行培养;S4:将上述得到的小球藻-小球藻内生菌共生体转移到沼液中,所述沼液中加入不同浓度的独脚金内酯GR24,然后将沼液置于一定条件下处理,得到处理后的沼液。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 嘉兴南湖学院 一种藻菌共生联合独脚金内酯削减沼液中抗生素抗性基因的处理方法

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