申请/专利权人：深圳市路美康尔医疗科技有限公司

申请日：2021-12-22

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN114235769B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.12#授权;2023.01.06#专利申请权的转移;2022.04.12#实质审查的生效;2022.03.25#公开

摘要：本发明涉及血细胞染色技术领域，具体为一种血细胞染色方法，包括以下步骤：S1、取一管荧光试剂A，将缓冲液B直接倒入荧光试剂A管中后，盖好管盖，上下摇晃混匀5‑90秒；S2、用50ul一次性的无菌吸管吸取10‑50ul全血，混入S1中，充分混匀5‑90秒；S3、用0.5ml‑5ml一次性无菌吸管将S2中的溶液吸取0.2ml‑0.5ml充入一次性的微流控卡壳中；S4、将微流控卡壳插入血细胞分析仪（POCT），自动分析出样本的测试结果。本发明染色时间短，操作方便，荧光试剂提供干粉装，降低了试剂的批间差，提高了试剂的稳定性，提高检验的准确率。

主权项：1.一种血细胞染色方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、取一管荧光试剂A，将缓冲液B直接倒入荧光试剂A管中后，盖好管盖，上下摇晃混匀5-90秒；S2、用50ul一次性的无菌吸管吸取10-50ul全血，混入S1中，充分混匀5-90秒；S3、用0.5ml-5ml一次性无菌吸管将S2中的溶液吸取0.2ml-0.5ml充入一次性的微流控卡壳中；S4、将微流控卡壳插入血细胞分析仪（POCT），自动分析出样本的测试结果；所述荧光试剂A为10-30ul支烤干了的荧光试剂，由荧光试剂C经过制作工艺X制成；所述荧光试剂C包括SYBRGreenI、吖啶橙、碘化丙啶、吖啶黄、4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）、奎纳克林芥子、赫斯特33342、沉香磷化氢、硫代黄素T和樱草素中的一种荧光试剂或多种的荧光试剂组合物；所述缓冲液B为已经分装好的470-1500ul支的缓冲液，由缓冲溶液D经过制作工艺Y制成；缓冲溶液D包括缓冲剂E、防腐剂和溶剂；所述制作工艺X的具体过程如下：S1称量荧光试剂C、D-海藻糖、溶剂依次放入干净的透明的玻璃瓶，盖上瓶盖摇晃至溶解充分，；配比后的荧光试剂C的含量为0.05-5gL、D-海藻糖含量为0.5-35gL；S2用10-100ml注射器连接0.22um0.45um过滤头，过滤S1中的液体放置在10-100ml干净的棕色玻璃瓶，4至8度冷藏保存；S3将S2中的荧光试剂分装成10-30ul支，放置在37度至60度烤箱烤干，或者冷冻干燥后备用，室温避光干燥储存；所述制作工艺Y的具体过程如下，且配比后各物质含量为：缓冲剂E6-15gL,防腐剂0.1-0.5mLL,其余物质为溶剂；S1量取溶剂、缓冲剂E依次加入烧杯中，搅拌溶解完全；S2称量氯化钠、含量比范围0.65%-0.85%、放入S1中的烧杯中，搅拌溶解完全；S3称量乙二酸四乙酸二钠或乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钾，含量为1.5-2.2mgml、放入S2中的烧杯中，搅拌溶解完全；S4量取防腐剂放入S3的烧杯中，搅拌均匀；S5用0.1%-10%HCL调S4溶液至pH7.3-7.7，搅拌均匀，静置15-60分钟；S6用0.22um0.45um滤头过滤S5中的液体后放置在干净的透明试剂瓶，室温密闭保存；S7将S6中的缓冲液分装成470-1500ul支备用，室温密闭储存；所述微流控卡壳包括卡壳本体、卡壳盖、加样孔、观察室1、观察室2、排气孔1和排气孔2；卡壳盖盖在卡壳本体的上表面，卡壳盖为塑料材质，卡壳本体为玻璃材质；卡壳本体上表面左端的中间位置开设有加样孔；卡壳本体中部中心位置前后两边分别开设有观察室1和观察室2；观察室1和观察室2的右方分别对应开设有排气孔1和排气孔2；观察室1和观察室2的长、宽、高不同、观察室1高度低于观察室2高度，且观察室1和观察室2的长、宽和高相交的位置均为圆弧状、非成夹角状；加样孔分别与观察室1和观察室2通过通道相通，观察室1和观察室2分别与排气孔1和排气孔2通过通道相通。

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