申请/专利权人：江南大学

申请日：2024-02-07

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887650A

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12N15/31;C12N15/60;C12P7/42;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.16#公开

摘要：本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌产乙醇酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明构建了一个乙醇酸传感器文库，并将构建好的乙醇酸控制乙醇酸合成路径关键基因的表达，使所述大肠杆菌可以自发生产乙醇酸，生产的乙醇酸又能激活乙醇酸传感器，从而增加乙醇酸合成路径关键基因的表达，将更多的代谢流引入乙醇酸合成路径中，实现了动态放大法生产乙醇酸。本发明通过过表达转氢酶基因pntAB和ED途径关键基因增加了NADPH的供给，通过敲除转氢酶基因减少了NADPH的消耗，最终菌株Mgly8‑245乙醇酸产量达到了5.64gL，理论转化率达到了83.5％，比对照组Mgly7‑24提高了36.2％。

主权项：1.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是以Mgly6为底盘细胞，进行下述a～g任一改造：a敲除了底盘细胞基因组上glcC基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因；b敲除了底盘细胞基因组上glcC基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因；c敲除了底盘细胞基因组上的glcC基因和sthA基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因；d敲除了底盘细胞基因组上的glcC基因和sthA基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因、PJ23102-Ecedd基因、Eceda基因；e敲除了底盘细胞基因组上的glcC基因和sthA基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因、PJ23105-Zmedd基因、Zmeda基因；f敲除了底盘细胞基因组上的glcC基因和sthA基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因、PJ23102-Zmedd基因、Zmeda基因；g敲除了底盘细胞基因组上的glcC基因和sthA基因，同时过表达了gltA基因、glcC基因、ycdW基因、aceA基因、pntAB基因、PJ23106-Zmedd基因、Zmeda基因；所述glcC基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述sthA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示，所述pntAB基因的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示，所述PJ23102-Ecedd基因的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示，所述Eceda基因的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示，PJ23105-Zmedd基因的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示，所述Zmeda基因的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示，所述PJ23102-Zmedd基因的核苷酸序列如SEQIDNO.11所示，所述PJ23106-Zmedd基因的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示，所述gltA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示，ycdW基因的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示，aceA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.15所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江南大学 一种代谢工程改造大肠杆菌产乙醇酸的方法

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