申请/专利权人：微康益生菌(苏州)股份有限公司

申请日：2022-07-20

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN115141793B

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071;C12N5/0786;C12N5/09;C12Q1/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2022.10.25#实质审查的生效;2022.10.04#公开

摘要：本发明提供一种评价调节肠道屏障功能和肠道免疫能力的方法。所述方法包括以下步骤：1在Transwell一端小室内形成Caco‑2单层细胞；将THP‑1细胞分化为人巨噬细胞样细胞；2使含有Caco‑2单层细胞的一端小室完全浸没于DMEM液体培养基中，另一端小室内接种THP‑1，使其浸没于RMPI1640中，培养；3采用RMPI1640培养基替换后，在含有Caco‑2的一端添加待检测物孵育；在含有THP‑1的一端添加脂多糖和或TNF‑α孵育；4检测Caco‑2侧培养物中脂多糖，评价免疫能力的调节作用；检测THP‑1侧培养物中TNF‑α、IL‑10或IL‑8，评价屏障功能的调节能力。

主权项：1.一种评价调节肠道屏障功能和肠道免疫能力的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1在Transwell孔板的一端小室内培养人结肠上皮细胞Caco-2，形成Caco-2单层细胞；将THP-1细胞进行培养，分化为人巨噬细胞样细胞THP-1；2将步骤1的Transwell孔板倒置，使含有Caco-2单层细胞的一端小室完全浸没于DMEM液体培养基中，再在倒置后的Transwell孔板另一端小室内接种人巨噬细胞样细胞THP-1，并使人巨噬细胞样细胞THP-1浸没于RMPI1640培养基中，两端同时进行培养；3采用RMPI1640培养基替换步骤2的DMEM液体培养基后，在含有Caco-2的一端添加待检测物后，进行孵育；并在含有THP-1的一端添加脂多糖和TNF-α后，进行孵育；所述待检测物为益生菌或后生元中的任意一种或两种的组合；所述待检测物在RMPI1640培养基中的含量为105～108CFUmL；所述脂多糖在RMPI1640培养基中的含量10～1000ngmL，所述TNF-α在RMPI1640培养基中的含量40～1000ngMl；4检测Caco-2侧培养物中脂多糖水平，评价待检测物对肠道屏障功能的调节能力；并检测THP-1侧培养物中TNF-α、IL-10或IL-8水平，评价待检测物对肠道屏障功能的调节能力。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种评价调节肠道屏障功能和肠道免疫能力的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD