申请/专利权人：苏州康唯纳思生物科技有限公司

申请日：2022-08-16

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN115161415B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/6816;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2022.10.28#实质审查的生效;2022.10.11#公开

摘要：本发明公开了一种引物和探针的组合及其在HPV分型检测中的应用，属于生物技术领域，引物和探针的组合中，引物包括上游引物、下游引物和内标基因的引物，探针包括31条特异性探针和内标基因的探针；上游引物与GP5+同源，下游引物与GP6+同源；上游引物的序列，以及下游引物的序列，各自分别与至少一个HPV型别中的基因序列有≦3个碱基的差异；内标基因为人类管家基因β‑globin。该组合能够有效扩增31种HPV基因型，可在单一PCR反应管中同时扩增31种型别HPV‑DNA，并且引物和探针的组合对31种型别的HPV均有很好的检测灵敏度和特异性，使31种型别的HPV感染情况都能得到正确评估。

主权项：1.一种引物和探针的组合，其特征在于：所述引物包括上游引物、下游引物和内标基因的引物，所述探针包括31条特异性探针和内标基因的探针；所述上游引物与GP5+同源，所述下游引物与GP6+同源；所述上游引物的序列与至少一个HPV型别中的基因序列有≦3个碱基的差异；所述下游引物的序列与至少一个HPV型别中的基因序列有≦3个碱基的差异；所述内标基因为人类管家基因β-globin；所述上游引物由F1、F2、F3、F4和F5组合而成，各自的序列分别为：F1：TTTGTTACTGTGGTAGATACTAC；F2：TTTGTTACTGTTGTGGATACCAC；F3：TTTGTTACTTGTGTTGATACTAC；F4：TTTCTTACTGTAGTGGACACTAC；F5：TTTTTAACAGTTGTAGATACTAC；所述上游引物中的F1、F2、F3、F4和F5的浓度相等，且等量混合，所述浓度的范围为0.1-0.5μM；所述下游引物由R1、R2、R3、R4、R5和R6组合而成，各自的序列分别为：R1:GAAAAATAAACTGTAAATCATATTC；R2:GAAACATAAATTGTAATTCATACTC；R3:GAAAAATAAACTGTAAATCAAATTC；R4:GAAACACAAACTGTAATTCATATTC；R5:GAAATATAAACTGCAAATCAAATTC；R6:GAAAAACAAACTGTAAATCAAACTC；所述下游引物中的R1、R2、R3、R4、R5和R6的浓度相等，且等量混合，所述浓度的范围为0.1-0.5μM；所述特异性探针分别与对应型别的HPV基因序列特异性结合，每条特异性探针和其对应的HPV型别如下： 。

全文数据：

权利要求：

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