申请/专利权人：北京凯莱谱生物科技有限公司

申请日：2023-08-11

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117929552A

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明提供了一种气相色谱串联质谱技术检测尿液55种有机酸和糖醇的方法。使用内标法对尿液样本中55种有机酸和糖醇定量检测，根据定量结果对人体代谢情况进行解读，定量下限可达到0.5μgmL。使用酶解‑肟化‑液液萃取‑硅烷化衍生的前处理方式，肟化采用氢氧化钠溶液调节pH，待测物响应高，峰型好，且处理后的样本具有良好的稳定性，在4℃和‑20℃保存条件下10天内稳定。本发明创新性的采用了玻璃耗材进行整个前处理过程，提高了定量的准确性。该方法目前已测试300例随机人群尿液样本，标准曲线范围能满足绝大部分临床尿液样本的检测需求，减少因待测物浓度过高而造成的二次复测。

主权项：1.一种气相色谱串联质谱技术检测尿液中有机酸和糖醇的方法，其特征在于，所述的方法包括以下顺序的步骤：1酶解：在玻璃离心管内加入脲酶，加入样本，进行酶解；2肟化：在玻璃离心管内再加入肟化试剂和NaOH溶液进行肟化反应，加入NaOH溶液调节pH至pH＝8.2～9，反应结束后加入HCl溶液中和；3液液萃取：加入乙酸乙酯，振荡并离心，用玻璃吸管移取上清至玻璃离心管；4硅烷衍生化：氮气吹干，加入硅烷化衍生试剂，孵育；5上机检测；所述有机酸和糖醇为乳酸，2-羟基丁酸，丙酮酸，3-羟基丁酸，β-羟基异戊酸，甲基丙二酸，苯甲酸，3-甲基-2-氧代戊酸，4-甲基-2-氧代戊酸，α-酮异戊酸，琥珀酸，吡啶-2-羧酸，富马酸，3-苯基丙酸，柠苹酸，苹果酸，己二酸，焦谷氨酸，苯乙酮酸，3-羟基-3-甲基戊二酸，4-羟基苯甲酸，α-酮戊二酸，4-羟基苯乙酸，酒石酸，辛二酸，丙三羧酸，2,3-吡啶二甲酸，阿拉伯糖醇，顺式乌头酸，乳清酸，高香草酸，柠檬酸，异柠檬酸，马尿酸，香草扁桃酸，2-甲基马尿酸，3-吲哚乙酸，5-羟基吲哚-3-乙酸，2-羟基马尿酸，3-羟基丙酸，2-羟基异戊酸，2-羟基异己酸，4-羟基苯乳酸，苯乳酸，乙基丙二酸，杏仁酸，戊二酸，丙二酸，4-羟基苯丙酮酸，尿黑酸，N-乙酰基-L-天冬氨酸，苯丙酮酸，苯乙酸，癸二酸，3,4-二羟基苯基丙酸中的任意一种或多种。

全文数据：

权利要求：

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