申请/专利权人：镁孚泰生物科技(上海)有限公司

申请日：2023-12-19

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN117946997A

主分类号：C12N9/12

分类号：C12N9/12;C12Q1/6844

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开

摘要：本发明提供了一种耐高温的BstDNA聚合酶突变体，系在截短的野生型BstDNA聚合酶基础上通过一个或多个不同位点的氨基酸突变而成，具有更高的热稳定性，Tm值明显高于野生型BstDNA聚合酶。相较于野生型BstDNA聚合酶，本发明的BstDNA聚合酶突变体在65℃孵育30min后残余活性明显提高，最高可进行70℃的RT‑LAMP反应。本发明的热稳定性提高的BstDNA聚合酶突变体具有更广泛的应用温度，能适应更加复杂的应用场景。

主权项：1.一种耐高温的BstDNA聚合酶突变体，其特征在于为如下a1-a4中任一所述的蛋白质：a1：在氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的野生型BstDNA聚合酶大片段的基础上进行突变得到的蛋白质，突变位点包括F67、F81、A114、D119、Q128、R133、I194、V281、N283、L320、T321、Q334、R339、L340、I359、S365、Y429、G430、R439、F445、E461、T487、T500、M502、N503、R553、A565中的任意一个或至少两个的组合；a2：将a1所示的氨基酸序列经过除前述突变以外的一个或几个氨基酸残基的取代和或缺失和或添加得到的具有基本相同的酶活性及热稳定性的蛋白质；a3：与a1的蛋白质具有90％以上的序列同源性，且酶活性及热稳定性与a1的蛋白质基本相当的蛋白质；a4：将a1-a3中任一所述的氨基酸序列的N端或和C端连接标签或酶切位点得到的融合蛋白质，该标签或酶切位点不影响BstDNA聚合酶突变体的功能。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 镁孚泰生物科技(上海)有限公司 耐高温的Bst DNA聚合酶突变体及其应用

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