申请/专利权人：广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所

申请日：2024-02-05

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN117987442A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C12N15/55;C12N9/20;C14C5/00;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.05.07#公开

摘要：本发明提供了一种水稻脂肪酶的制备方法以及在热碱环境下脱脂的应用，属于基因工程和化学工程领域。本发明通过重组水稻脂肪酶基因在体外表达的方法获得纯度和收率较高的水稻脂肪酶，且活性也处于较高水平；在高温碱性环境下水稻脂肪酶能保持较高的活性，能够保证在80℃以上高温和pH10以上的碱性环境具有较高的脱脂效率，解决了常温脂肪酶在高温软化皮革体系中因温度或pH过高失活而难以发挥脱脂效果的瓶颈问题；本发明方法具有蛋白表达量高，纯化简便，易于放大，适合工业化应用等特点。

主权项：1.一种水稻脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1利用全基因合成技术，合成水稻脂肪酶的基因序列并连接至载体质粒pETNusA上，酶切位点为BamHI和EcoRI，构建水稻脂肪酶重组表达质粒pETNusA-oslip；2将重组表达质粒pETNusA-oslip转入到大肠杆菌Rosetta-gamiBDE3感受态细胞中，得到重组表达菌；3将重组表达菌接种到LB培养基培养至OD600达到0.6～0.8，在16～37℃条件下添加0.2～1.0mMIPTG诱导重组蛋白表达4～12小时后收集菌体；4将收集的菌体经冰浴超声破碎后，离心收集上清液，利用Ni-NTA纯化水稻脂肪酶蛋白，再经透析脱盐处理，获得水稻脂肪酶。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 一种水稻脂肪酶的制备方法以及在热碱环境下脱脂的应用

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