申请/专利权人：上海康黎医学检验所有限公司

申请日：2024-01-05

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN118010863A

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开

摘要：本发明提供了一种基于液相色谱串联质谱法检测干血斑中镇静类药物浓度的方法，包括将血清滴在干血采集卡上晾干，将标准曲线和质控品混匀后滴在干血斑上晾干，然后加入内标沉淀剂超声震荡混合离心分离，得到上清液；取标准曲线、质控品和待测样本处理后的上清液注入液相色谱‑串联质谱仪进行检测，以标准曲线的浓度为横坐标x，以实际检测峰面积与各自内标峰面积的比值为纵坐标y，绘制标准曲线并拟合，要求相关系数不低于0.990，将待测样本中3种血药的峰面积与内标峰面积的比值分别代入标准曲线方程，计算待测样品中各药物浓度。本发明操作简单，检测准确度高，样本运输及储存条件要求低，极大解决了偏远地区样本运输问题。

主权项：1.一种基于液相色谱串联质谱法检测干血斑中镇静类药物浓度的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、前处理：S1a、将标准曲线、质控品和采集到的血清分别滴在干血采集卡上，室温下晾干，分别得到标准曲线干血斑样本、质控品干血斑样本和待测干血斑样本；所述标准曲线是指将含有劳拉西泮、扎来普隆和奥沙西泮的甲醇溶液加入空白血清中，配制成不少于6个具有浓度梯度的混合液；所述质控品是指将含有劳拉西泮、扎来普隆和奥沙西泮的甲醇溶液加入空白血清中，配制成3个具有不同浓度的混合液；S1b、取步骤S1a得到的干血斑样本分别置于样品管中；S1c、分别加入内标沉淀剂；S1d、将样品管置于多管涡旋混合器上，以1000-2000rpm震荡混合5-15min，超声5-15min，然后以1000-2000rpm震荡混合5-15min，12000-18000rpm离心3-10min；S1e、取上清液，分别得到标准曲线样本上清液、质控品样本上清液和待测样本上清液；S2、质谱检测：S2a、样品检测：取标准曲线样本上清液、质控品样本上清液和待测样本上清液注入液相色谱-串联质谱仪进行检测，记录待测样本上清液中3种血药，即劳拉西泮、扎来普隆、奥沙西泮的峰面积响应；S2b、标准曲线图绘制：以不少于6个不同浓度的标准曲线的浓度为横坐标x，以各标准曲线的实际检测峰面积与各自内标峰面积的比值为纵坐标y，绘制标准曲线图；S2c、标准曲线方程拟合：以各标准曲线的峰面积比值y对标示浓度x进行线性回归，可获得回归方程：y=a+bx，其中y为纵坐标，x为横坐标，a为截距，b为斜率，并计算相关系数r，要求r应不低于0.990；S2d、样本检测结果计算：将待测样本上清液中3种血药的峰面积与内标峰面积的比值分别代入上述各自的标准曲线回归方程，分别计算得到待测样本上清液中各药物的浓度。

全文数据：

权利要求：

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