申请/专利权人：苏州百奥吉生物科技有限公司

申请日：2021-12-29

公开（公告）日：2024-05-17

公开（公告）号：CN114377626B

主分类号：B01J13/02

分类号：B01J13/02;B01J13/14;C07K16/00;C07K1/22

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.17#授权;2022.05.10#实质审查的生效;2022.04.22#公开

摘要：本发明提供了一种新型复合多糖proteinA磁珠及其制备方法，同时采用琼脂糖及一种或多种其他具有亲水性可交联的间隔臂纤维素、葡聚糖进行成球，可以将纤维素或者葡聚糖覆盖在以琼脂糖微球的表面，琼脂糖在微球中充当骨架作用，纤维素或葡聚糖可以一端固定在琼脂糖骨架上，游离的另一端与蛋白A进行结合，从而达到增加微球的比表面积，增加微球载量，进而降低纯化成本的目的。

主权项：1.一种新型复合多糖proteinA磁珠的制备方法，包括：1）制备复合多糖微球基球，包括：1-1）制备含有多糖的油相：将非极性有机溶剂在搅拌状态下加热至50-90℃，然后将司班80和司班60的混合物或者司班80和吐温20的混合物或者司班80、司班60和吐温20的混合物加入非极性有机溶剂中得混合油相，然后再按照混合油相：多糖=125:1-2的质量比加入纤维素或葡聚糖，搅拌使其完全溶解备用；1-2）制备水相：制备琼脂糖水溶液，然后按照琼脂糖水溶液：四氧化三铁粉末=100：0.1-2的质量比将四氧化三铁粉末加入其中，搅拌；1-3）按照质量比5:1-5将步骤1-2）制备的水相加入步骤1-1）制备的油相中，搅拌，然后将反应在1h内降温至20℃以下；1-4）使用去离子水进行清洗，去除有机相，得到复合多糖微球基球；2）交联活化，包括：2-1）将交联活化剂以及能够和水、非极性有机试剂均有良好互溶性的溶剂与复合多糖微球基球按照1:0.8-1.2:0.8-1.2的体积比混合；2-2）将步骤2-1）得到的混合体系加热至30-40℃，按照微球：氢氧化钠=10:0.5-2的体积质量比向其中加入30-60%氢氧化钠，反应3-18h，得到环氧基活化的复合多糖微球；2-3）使用乙醇和去离子水对活化的复合多糖微球进行清洗，清除有机试剂及氢氧化钠，使其达到中性；3）偶联ProteinA配基，包括：按照ProteinA:磷酸盐缓冲液=1-1.5：100的质量体积比将ProteinA配基溶解于磷酸盐缓冲液中，然后与活化的复合多糖微球按照体积比1:1混合，向反应器中通入氮气，密封，排除空气，反应得到复合多糖磁性微球。

全文数据：

权利要求：

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