申请/专利权人:江西农业大学
申请日:2015-11-03
公开(公告)日:2016-01-13
公开(公告)号:CN105233305A
主分类号:A61K48/00(2006.01)I
分类号:A61K48/00(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I
优先权:
专利状态码:失效-发明专利申请公布后的驳回
法律状态:2019.05.24#发明专利申请公布后的驳回;2016.02.10#实质审查的生效;2016.01.13#公开
摘要:本发明公开了一种促进畜禽生长的GM-CSF基因与SS基因共表达DNA疫苗pIRES-GM-CSF2SS的方法,涉及动物医药生物工程领域。该方法是选择共表达载体pIRES,将GM-CSF与SS基因分别插入pIRES 载体的MCS A和MCS B两个多克隆位点,构建GM-CSF基因与SS基因共表达DNA疫苗。pIRES-GM-CSF2SS疫苗采用一次注射,它能同时表达出SS和GM-CSF两个完全独立的GM-CSF和SS蛋白,它利用基因佐剂GM-CSF对生长抑素基因疫苗进行免疫调节,从而减少了工作量及对免疫动物的应激影响,能保持独立的免疫原性,增强了免疫效果。该疫苗可作促进畜禽生长用。
主权项:一种促进畜禽生长的GM‑CSF基因与SS基因共表达DNA疫苗pIRES‑GM‑CSF2SS的方法,其特征在于:具体步骤如下:A、将pIRES质粒用Nhe I和EcoR I进行双酶切,以pVGS2ss‑asd质粒为模板,PCR获取猪GM‑CSF基因,胶回收GM‑CSF基因与T载体进行连接反应,构建阳性重组质粒pIRES‑GM‑CSF;B、以pVGS2ss‑asd质粒为模板,用Nhe I 和Hind Ⅲ进行双酶切,PCR获取猪SS基因,用Not I和Sal I进行双酶切与T载体进行连接反应,构建T2SS质粒;C、采用NotI和SalI内切酶分别酶切pIRES‑GM‑CSF质粒和T2SS质粒,将纯化、回收的pIRES‑GM‑CSF大片段和2SS片段进行连接反应,构建真核表达质粒pIRES‑GM‑CSF2SS,得到DNA疫苗pIRES‑GM‑CSF2SS。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 江西农业大学 促进畜禽生长的GM-CSF基因与SS基因共表达DNA疫苗pIRES-GM-CSF/2SS的方法
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