【发明公布】一种同时检测玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1的方法_上海市农业科学院_201911081096.8 

申请/专利权人:上海市农业科学院

申请日:2019-11-07

发明/设计人:韩铮;聂冬霞;赵志辉;唐占敏;郭文博;蒋可秋

公开(公告)日:2020-02-18

代理机构:上海容慧专利代理事务所(普通合伙)

公开(公告)号:CN110806439A

代理人:张竹梅

主分类号:G01N27/327(20060101)

地址:201106 上海市闵行区北翟路2901号

分类号:G01N27/327(20060101);G01N27/30(20060101);G01N27/48(20060101)

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2020.02.18#公开

摘要:本发明公开了一种同时检测玉米赤霉烯酮ZEN和伏马毒素B1FB1的方法,还公开了一种用于同时检测玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1的适配体传感器,该适配体传感器是由如下方法制备:1向玻碳电极覆盖还原性二硫化钼和金纳米粒子复合物rMoS2‑Au纳米材料,晾干;2随后在电极上滴涂玉米赤霉烯酮核酸适配体AP1和伏马毒素B1核酸适配体AP2的混合溶液,1~10μmolL,vv,11,进行孵育1~10h,用1mgmLBSA封闭;3最后,滴涂自主研制的5'端修饰金纳米粒子和硫堇的ZEN核酸适配体部分互补序列CP1‑Au‑Thi溶液与5'端修饰金纳米粒子和二茂铁基己硫醇的FB1核酸适配体部分互补序列CP2‑Au‑FC6S溶液的混合溶液,1~10μmolL,vv,11,进行孵育1~10h,即得到所需的适配体传感器。本发明提供的方法,适用于玉米及饲料等农产品中ZEN和FB1的快速同时检测,有效防止超标ZEN和FB1农产品流入市场,保障人民群众的饮食安全。

主权项:1.一种同时检测玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1的适配体传感器的制备方法,其特征在于该方法包括如下步骤:1向玻碳电极覆盖还原性二硫化钼和金纳米粒子复合物rMoS2-Au纳米材料,晾干;2随后在电极上滴涂玉米赤霉烯酮核酸适配体AP1和伏马毒素B1核酸适配体AP2的混合溶液,1~10μmolL,vv,11,进行孵育1~10h,用1mgmLBSA封闭;3最后,滴涂5'端修饰金纳米粒子和硫堇的ZEN核酸适配体部分互补序列CP1-Au-Thi溶液与5'端修饰金纳米粒子和二茂铁基己硫醇的FB1核酸适配体部分互补序列CP2-Au-FC6S溶液的混合溶液,1~10μmolL,vv,11,进行孵育1~10h,即得到所需的适配体传感器;其中,rMoS2-Au纳米材料是通过以下方法制备得到的:向N,N-二甲基甲酰胺DMF中加入单层二硫化钼MoS2和三水合氯金酸HAuCl4·3H2O,使得两者浓度分别为0.1~1mgmL、0.1-2%,室温下超声处理10~60min后,得到MoS2和HAuCl4·3H2O复合物的分散液;将该分散液滴到玻碳电极上,晾干,然后在NaCl溶液中电化学还原,即得;其中所述CP1-Au-Thi溶液是通过如下方法制备得到的:用TE缓冲液pH4.0~8.0将ZEN核酸适配体部分互补链CP1稀释到1~10μmolL,取0.5~5mLCP1溶液与1~10mL金纳米粒子分散液轻微振荡1-20h,室温静置后离心5~60min,3000~10000rpm,后去除上层清液,将沉淀物重新分散于0.1~5mLTE溶液中;加入1~10mLThi溶液,轻微振荡1~20h,室温静置后离心5~60min,3000~10000rpm,去除上层清液,将沉淀物重新分散于0.1~5mLTE缓冲溶液中,即制得CP1-Au-Thi溶液;其中所述CP2-Au-FC6S溶液是通过如下方法制备得到的:用TE缓冲液pH4.0~8.0将FB1核酸适配体部分互补链CP2稀释到1~10μmolL,取0.5~5mLCP2溶液与1~10mL金纳米粒子分散液轻微振荡1~20h,室温静置后离心5~60min,3000~10000rpm,去除上层清液,将沉淀物重新分散于0.1~5mLTE溶液中;加入1~10mLFC6S溶液,1~20mmolL,轻微振荡1~20h,室温静置后离心5~60min,3000~10000rpm,去除上层清液,将沉淀物重新分散于0.1~5mLTE缓冲溶液中,即制得CP2-Au-FC6S溶液。

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