申请/专利权人：四川大学;普洛药业股份有限公司

申请日：2017-07-03

公开（公告）日：2020-03-31

公开（公告）号：CN107573327B

主分类号：C07D401/14(20060101)

分类号：C07D401/14(20060101);C07D401/12(20060101);A61K31/496(20060101);A61K31/5377(20060101);A61P35/00(20060101);A61P35/02(20060101);A61P37/02(20060101);A61P17/06(20060101)

优先权：["20160705 CN 2016105202456"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2020.03.31#授权;2018.02.06#实质审查的生效;2018.01.12#公开

摘要：本发明属于化学医药制备领域，具体涉及吲唑‑甲酰胺‑吡啶酮衍生物及其制备方法和用途。本发明提供了一类吲唑‑甲酰胺‑吡啶酮衍生物，结构如式I所示。本发明还提供上述吲唑‑甲酰胺‑吡啶酮衍生物的制备方法和用途。本发明提供的吲唑‑甲酰胺‑吡啶酮衍生物，是在大量筛选的基础上得到的新化合物，具有抑制EZH2活性，为抗肿瘤和自身免疫性疾病的药物开发和应用提供了新的选择。

主权项：1.吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，结构如式I所示： 其中，W、X、Y、Z独立地为N或C；V为O或N；R1～R3独立地为-H、C1～C4烷基、-CF3、-NO2、C1～C4烷氧基、卤素；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5～C8环烷基；R4、R5独立地为-H、-CF3、C5～C8环烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或苄基；m＝1～6；R6独立地为-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5～C8环烷基；n＝0～4；R7为-H、C1～C4烷基、C5～C8环烷基或苄基。

全文数据：吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物及其制备方法和用途技术领域[0001]本发明属于医药领域，具体涉及吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物及其制备方法和用途。背景技术[0002]现今肿瘤已成为一类严重威胁人类健康和生命的多发病和致死病，其致死率已经超过心脑血管类疾病，成为人类健康的第一大杀手。近年来，全世界恶性肿瘤的发病率呈不断上升的趋势。表观遗传修饰epigeneticmodification在包括细胞增殖、分化和细胞存活的许多细胞过程的调节中发挥重要作用。包括在DNA或组蛋白甲基化中的整体改变、非编码RNA和核小体重塑失调，其导致肿瘤基因、肿瘤抑制基因和信号通路的异常活化或失活。研究表明，很多疾病如肿瘤、神经发育紊乱、神经变性、神经系统疾和自身免疫性疾病等的发生、发展都与表观遗传学修饰标志类型出错或者修饰的时间或地点出错有关。EZH2是蛋白PRC2的核心组成部分，起组蛋白甲基转移酶的作用，能使H3K27侧链上的ε氨基发生三甲基化。Η3Κ27三甲基化被认为是在PcG沉默机制中起作用的主要存在形式。三甲化后的Η3Κ27后能将PRCl复合物招募到特定基因位点，从而沉默与细胞分化、抑制增殖在内的基因，导致肿瘤的发生。目前，已经发现在弥漫性大B细胞淋巴瘤、乳腺癌，结直肠癌，横纹肌瘤等多种肿瘤中有ΕΖΗ2的过表达，这使得ΕΖΗ2成为治愈肿瘤的潜在靶点。[0003]越来越多的证据表明，对于抗癌治疗的长期有效需要两个或更多的癌基因途经的共同抑制，而采用特异性抑制剂来对癌症表观基因组进行调解可能会直接改变获得性转录抗性机制的有效组合疗法。因此开发ΕΖΗ2选择性抑制剂有望与其他药物联合作用，达到彻底治愈肿瘤的效果。[0004]目前认为肿瘤的发生、治疗抵抗和复发转移皆依赖于肿瘤干细胞的自我更新、多向分化及其高致瘤性。尽管肿瘤干细胞在肿瘤体积中所占的比例还不到5%，其不断的自我更新能力及对放化疗抵抗是肿瘤难以根除的根源所在。目前有文献报道ΕΖΗ2功能与肿瘤干细胞的自我更新，转移等恶性生物学特性相关，因此开发ΕΖΗ2选择性抑制剂有望能同时彻底杀死肿瘤干细胞，为彻底治愈肿瘤避免复发带来希望。[0005]因此以ΕΖΗ2为靶点的靶向小分子抑制剂在多种实体瘤与血液瘤中既能抑制分化细胞的增殖又能彻底杀死肿瘤干细胞，同时有望克服肿瘤获得性耐药，因此开发ΕΖΗ2抑制剂能避免耐药与复发，从而彻底治愈肿瘤。发明内容[0006]本发明所要解决的第一个技术问题是提供一类吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，结构如式I所示：[0007][0008]其中，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;[0009]RfR3独立地为-H、Cl〜C4烷基、-CF3、-NO2、Cl〜C4烷氧基、卤素;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基；[0010]R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、、C1〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基或节基;m=l〜6;[0011]R6独立地为_CF3、C1〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-N〇2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基;n=0〜4;[0012]R7S-HXl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0013]作为本发明优选的方案，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为C4烷基、Cl〜C4烷氧基、卤素；或，RdPR3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基;R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基.Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜6;R6!»独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-N〇2、-Mfe、卤素苄基或C5〜08环、烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[00M]优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R^R3独立地为-H、C1〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基;R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、、C1〜C4烷基Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜6;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5V〜C8环烧基或节基。[0015]进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基；R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基.Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜6;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为-H、ci〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0016]优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R^R3独立地为-H、C1〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基；R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜4;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为_H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或节基。[0017]进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基或m=l〜4;1?6独立地为-0?3、：1〜04烷基、：1〜04烷氧基、-_2、-冊2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0018]更进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，RjPR3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基；1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=1〜4;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0019]优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烧基；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、1?5独立地为-H、C5〜C8环烷基或m=1〜4;R6独立地为Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、卤素、或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为-H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0020]进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R^R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m?=1〜4;R6独立地为Cl〜C4烷基或n=0〜4;1?7为-11、：1〜：4烷基、05〜08环烷，'基或节基。[0021]更进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，RjPR3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基；1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或111=1〜4;1?6独立地为n=0〜2;1?7为-11、：1〜04烷基、05〜08环烷基或苄基。[0022]优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;，R6独立地为n=0〜2;R7为-H、C1〜C4烷基或苄基。[0023]进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R^R3独立地为-H、C1〜C4烷基；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、恥独立地为-H、C5〜C8环烷基或m5=1〜4;R6独立地为n=O〜2;R7为-H或Cl〜C4烷基。9[0024]最优的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N5R1-R3独立地为-H、C1〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、恥独立地为_H、C5〜C8环烷基或’m=l〜4;9R6独立地为地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-N〇2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，、.n=0〜4;R7为_H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。[0037]本发明所还提供上述式I所示的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物的盐或水合物。[0038]本发明还提供了上述式I所示的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物及其盐或水合物在制备抗肿瘤药物或自身免疫疾病药物中的用途。[0039]上述用途中，所述的肿瘤为脑癌、成胶质细胞瘤、白血病、淋巴瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、维尔姆斯瘤、尤因肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、胃癌、膀胱癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、肾脏癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤或甲状腺癌。[0040]上述用途中，所述的自身免疫性疾病为银肩病或红斑狼疮。[0041]本发明还提供了一种药物组合物，是由上述式I所示的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物添加药学上可以接受的辅助性成分制备而成的。该药物组合物可用于制备抗肿瘤药物或自身免疫疾病药物。[0042]本发明的吡啶酮衍生物是在大量筛选的基础上得到的新化合物，具有抑制EZH2活性，为抗肿瘤和自身免疫性疾病的药物开发和应用提供了新的选择。具体实施方式[0043]以下结合实施例对本发明作进一步的阐述。实施例仅用于说明本发明，而不是以任何方式来限制本发明。[0044]实施例1中间体4,6_二甲基-3-胺甲基吡啶酮及卜甲基-4-胺甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉酮的制备14,6_二甲基-3-胺甲基吡啶酮的制备：[0045][0046]步骤1:制备4，6_二甲基-3-氰基吡啶酮[0047][0048]将戊二酮（10g，0.Imol、氰基乙酰胺8.4g，0.Imol和氢氧化钠4g，0.Imol加入到无水乙醇中，室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，停止反应，将析出固体物质抽滤，并用少许水、乙醇、乙醚洗涤，干燥，得白色固体物4，6-二甲基-3-氰基吡啶酮142g，95.8%。[0049]=3H，2·27s，3H。[0050]步骤2:制备4，6-二甲基-3-胺甲基吡啶酮[0051][0052]将1-甲基-4-氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉酮（14.8g，0.Imol置于甲醇溶液中，加入5g自制雷尼镍和15毫升氨水，氮气置换后再用氢气置换，密闭条件下保持氢气压强为IOMPa，缓慢升温至72°C搅拌过夜。停止反应，TLC监测反应完全后，冷却至室温并过滤去催化剂。真空浓缩反应液，得无色油状物，放置后固化。[0053]4^^40011^,011^^0^11-1512.51^=5.9^,111,5.918,111,4.531,1=5.9Hz，2H，4.19Br，2H，2.38s，3H，2.27s，3H。[0054]2U-甲基-4-胺甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉酮的制备：[0055][0056]步骤1:制备1-甲基-4-氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉酮和4-甲基-3-氰基-5，6，7，8-四氢喹啉酮[0057][0058]在一2L三颈瓶中，依次一次性加入700mL乙醇、HOg乙酰环己酮、93g氰基乙酰胺和370g三乙烯二胺六水，加热至40°C，固体完全溶解，大约1小时后有固体出现，并于该温度下保温反应2天。TLC点板监测反应完全后趁热过滤，滤饼用50mL乙醇润洗，得白色固体物。将该固体物与200毫升乙醇混合回流打浆30分钟，冷却，过滤，得1、1’混合物，IHNMR显示混合物中nl:nl’=89:11。[0059]1：1HNMR400MHz,DMS0-d6512.31s,lH,2.71d,J=5.2Hz,2H,2.36dJ=5.5Hz,2H,2.21s,3H,1.75-1.59m,4H；13CNMR101MHz,DMS〇-d65160.37,160.21,150.39,116.61,113.41,98·34,29.42,23.80,22.18,21.46,17.31;m.p·253°C分解；MSmz:CnHi2N4O：[M+Na]+211.09〇[0060]I'：1HNMR400MHz,DMS0-d6512.06s,IH,2.53d,J=5.2Hz,2H,2.40-2.32m，2H,2.27s,3H,1.80-1.54m,4H;13C匪R101MHz，DMS0-d6Sl60.45,160.19，149.07,116.89,113.54,100.71,27.49,23.65,22.11,21.05,18.86;;m.p·246cC分解；MSmz:CnHi2N4O:[M+Na]+211.09.[0061]步骤2:制备I-甲基-4-胺甲基-5，6,7,8-四氢异喹啉酮[0062][0063]将1-甲基-4-氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉酮（18.8g，0.Imol置于甲醇溶液中，加入5g自制雷尼镍和15毫升氨水，氮气置换后再用氢气置换，密闭条件下保持氢气压强为IOMPa，缓慢升温至72°C搅拌过夜。停止反应，TLC监测反应完全后，冷却至室温并过滤去催化剂。真空浓缩反应液，得无色油状物，放置后固化。[0064]4^^40010^,01^0-16612.318,111,4.531,1=5.9^,211,4.19812¾,2.71d,J=5.2Hz，2H,2.36d,J=5.5Hz，2H,2.21s，3H,1.75-1.59m，4H;13C匪R101MHz,DMS0-d65161.32,158.21,150.28,116.16,114.31,96.24,29.40,23.88,22.28,21.56,17.30。[0065]实施例21-环己基-5-[6-4-甲基哌嗪-1-基吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2氧代-1，2_二氢吡啶-3-甲基胺的制备[0066][0067]步骤1:制备5-溴吲唑-3-羧酸[0068][0069]向无水醋酸4L中加入苯并吡唑-3-羧酸81.1g，0.5mol，加热至90°C，搅拌，直至固体物完全溶解。小心慢慢滴加液溴（160g，Imol与无水醋酸300mL的混合溶液。控制滴加速度，使液溴尽可能不挥发出冷凝管。体系保温于90°C，搅拌过夜。次日，体系中有大量固体物析出。HPLC监测反应完成后，将反应体系冷至室温并放置3h以上，抽滤。固体物经少许乙酸乙酯、乙醚洗涤，干燥。将所得固体与乙醇500mL回流Ih后，冷却，抽滤出白色固体，干燥。得5-溴苯并吡唑-3-羧酸102.2g，收率84.8%。[0070]1H匪R400MHz，CDCl3_dδ:13.95s，lH;13.18br，s，lH;8·21d，J=1·2Ηζ，1H;7.65d，J=7.0Hz，lH;7.56dd，J=7.0，1.2Hz，lH。[0071]步骤2:制备5-溴吲唑-3-羧酸甲酯[0072][0073]将5-溴苯并吡唑-3-羧酸（120.52g，0.5mol置于甲醇600mL中，冰浴冷却后小心加入浓硫酸50mL。撤去冰浴，升温回流过夜，TLC检测反应完成。减压下旋去溶剂后，将剩余物小心加入2升碎冰中，待冰融化完全后，抽滤，得大量白色片状固体。用乙酸乙酯萃取500mLX2滤液。合并有机相，再分别用水（IL、饱和碳酸氢钠水溶液、水（IL、饱和食盐水IL洗涤，有机相再用无水硫酸钠干燥后，真空浓缩，得到5-溴苯并吡唑-3-羧酸甲酯113g，产率89.0%。[0074]1HMlR400MHz，CDCl3-dδ:14.13s，lH;8·21d，J=1·6Ηζ，1H;7.67d，J=7.2Hz，lH;7.59dd，J=7.2，1.6Hz，lH;3.92s，3H。[0075]步骤3:制备I-环己基-5-溴吲唑-3-羧酸甲酯[0076][0077]溶解5-溴苯并卩比卩坐-3-羧酸甲酯（102.03g，0.4mol于干N,N-二甲基甲酰胺600mL中，一次性加入无水碳酸钾（110.4g，0.8mol，搅拌10分钟，滴加溶有溴代环己烷71.75g，0.44mo1的N，N-二甲基甲酰胺溶液。反应体系于80°C反应过夜。TLC监测反应完成，将体系倒入Ikg碎冰中，并用水稀释，并用乙酸乙酯萃取（I.5LX3水相。合并有机相，分别用水2LX3、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。在减压条件下除去乙酸乙酯后，将残余混合物用硅胶拌干后，在200-300硅胶柱上采用流动相为石油醚：乙酸乙酯=40:1的柱层析条件提纯得到白色产物1-环己基-5-溴吲唑-3-羧酸甲酯48.2g，收率35.7%和2-环己基-5-溴吲唑-3-羧酸甲酯32.Ig，收率23.8%。[0078]=dd,J=9.1,1.9Hz,1H,6.20-5.94m,1H,3.39s,3H,1.89dJ=12.2Hz,2H,1.64dd,J=38.0，12.4Hz，2H,1.48-0.99m，6H;13C匪R101MHz，DMS0-d6Sl61.04,145.27，129.54,124.84,124.66,123.82,120.73,117.93,62.72,60.02,32.57,25.84,25.00〇[0079]步骤4:制备5-溴-I-环己基吲唑-3-羧酸[0080][0081]溶解5-溴-1-环己基吲唑-3-羧酸甲酯33.72g，0.Imol于甲醇250mL中，慢慢滴加含氢氧化锂一水合物8.4g，0.2mol的饱和水溶液，室温搅拌过夜，TLC检测酯未水解完全。升温至40°C并搅拌过夜后TLC检测酯水解完全。冷至室温并慢慢滴加2M稀盐酸调pH=3-4,并用乙酸乙酯萃取（200mLX3，合并有机相并经水、饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥。有机溶液经减压浓缩得油状物，放置，油状物固化为白色固体5-溴-1-环己基吲唑-3-羧酸30.7g，收率95%。[0082]咕匪1?4001取，0150-16313.868，1!1，8.181，了=1.8泡，1!1，7.771，了=9.0Hz,lH,7.45dd,J=9.1,1.9Hz,1Η,6.20-5.94m,1H,1.89dJ=12.2Hz,2H,1.64dd,J=38.0,12.4Hz,2H,1.48-0.99m,6H；13CNMR101MHz,DMS〇-deδ161.04,145.27,129.54,124.84,124.66,123.82,120.73,117.93,62.72,32.57,25.84,25.00〇[0083]步骤5:制备5-溴-I-环己基-IH-吲唑-3-甲酰4，6-二甲基-2氧代-I，2-二氢吡啶-3-甲基胺[0084][0085]溶解5-溴-1-环己基吲唑-3-羧酸（32.32g，0.Imol和4，6_二甲基-3-氨甲基吡啶酉同（30.44g，0.2mol于干二甲亚砜（250mL中，随后加入HOAT27.2g，0.2mol和EDCI38.2g，0.2mo1，室温搅拌过夜。TLC监测反应完全，将体系混合物倒入碎冰中，有大量固体物析出，搅拌，待冰完全融化后，抽滤得滤饼。将固体混合物用硅胶拌干后，在200-300硅胶柱上采用流动相为二氯甲烷：甲醇=50:1的柱层析条件提纯得到白色产物5-溴-1-环己基-IH-吲唑-3-甲酰4，6-二甲基-2氧代-1，2-二氢吡啶-3-甲基胺27·8g，收率60·8%。[0086]1HMffi400MHz，Chloroform-dδ12.35s，lH,7.88t，J=6.2Hz，1H,7.65dd，J=8.8,1.7Hz,lH,7.51dJ=1.7Hz,1H,6.80d,J=8.8Hz,1H,5.96s,lH,4.76dJ=6.1Hz,2H,4.62-4.40m,lH,2.47s,3H,2.39s,3H,2.10-1.76m,6H,1.46m,2H,I·38-1·24m,2H;13C匪R101MHz，Chloroform-dδ165·64，157·38，142·74，136·72，132.48,127.00,125.66,123.32,122.85,119.80,109.87,109.73,106.28,65.79,34.80,32.04,25.69,25.34,19.57,18.64〇[0087]步骤6:制备I-环己基-5-[6-4-甲基哌嗪-I-基吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰4，6-二甲基-2氧代-1，2-二氢吡啶-3-甲基胺[0088]将5-溴-1-环己基-IH-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2氧代-1，2-二氢吡啶-3-甲基）胺（457.4mg，I.Ommol，6_4-甲基哌嗪）卩比啶-3-硼酸频哪酯（334mg，1·Immol，[1，1双二苯基膦二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物40mg，0.05mmol加入到圆底烧瓶中，随后加入二氧六环5mL和3.6N的碳酸钠水溶液（ImL，氮气置换三次并在氮气氛围中，100°C加热4小时。TLC监测反应完成，减压下旋去有机溶剂后加水稀释并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯相分别用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机溶剂在减压下除去，固体混合物用硅胶拌干后，在200-300硅胶柱上采用流动相为二氯甲烷：甲醇=40:1的柱层析条件提纯得到白色产物1-环己基-5-[6-4-甲基哌嗪-1-基吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2氧代-1，2-二氢吡啶-3-甲基胺425.9mg，收率76.9%。[0089]1H400MHz，Chloroform-dSl1.86s，lH，8·50dd，J=8.8,2.1Hz，2H，7·93t,J=6.2Hz,lH,7.84dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.56dd,J=8.8,1.7Hz,1H,7.48d,J=8.8Hz,lH,6.73d,J=8.8Hz,lH,5.94s,lH,4.63d,J=6.2Hz,2H,4.40dq,J=10.8,5.0Hz,lH,3.64t,J=5.OHz,4H,2.59t,J=5.OHz,4H,2.44s,3H,2.39s,3H,2.33s，3H,2.12-1.87m，7H，1.47q，J=12.7Hz，2H。[0090]13C匪R101MHz，Chloroform-dδ165·16，162·52，158·43，150·58，146·33，142.33,139.19,137.11,136.61,132.94,126.51,125.47,123.75,122.76,119.78,109.80，109.60,106.92,58.76,54.82,46.12,45.18,34.83,32.44,29.71,25.67,19.75,18.95。[0091]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC3IH37N6O3{[M+H]+}541.2927,found541.2934〇[0092]实施例32-环己基-5-[6-吗啡啉-4-基吡啶-3-基]-2H-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶酮-3-基）甲胺[0093][0094]经过与合成实例3类似的反应，只是在第四步反应时以2-环己基-5-溴吲唑-3-羧酸甲酯为原料，得到目的化合物，产率82%。[0095]=6.2Hz,lH,7.66-7.60m,3H,7.48d,J=8.9Hz,1H,7.38d,J=7.9Hz,2H,5.96s,1H,4.64d,J=6.1Hz,2H,4.49-4.31m,lH,3.73t,J=4.6Hz,4H,2.48t,J=4.6Hz,4H,2.44s，3H,2.36s，3H,2.03td，J=11.7,10.6,4.2Hz，3H,1.98-1.88m，3H,1.78dt，J=13.2,3.3Hz，lH,1.46dddd，J=17.0,13·3,8·0,3·7Ηζ，2Η,1.37-1.19m，3H。[0096]13C匪R101MHz，Chloroform-dδ165.59,162.49,150.71，142.85,140.10，139.41,137.33,136.35,135.54,129.60,127.34,126.18,123.63,122.51,120.76,109.78，109.58,67.02,58.73,53.64,34.84,32.45,25.67,25.33,19.76,18.84〇[0097]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC3IH37N6O3{[M+H]+}541.2927,found541.293l〇[0098]实施例4I-4-甲氧基-I-丁基-5-[4—吗啡啉-4-基）甲基吡啶基]-IH-吲唑-3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0099][0100]经过与合成实例3类似的反应，只是在步骤3中使用1-溴-4-甲氧基丁烷为原料，得到目的化合物，产率64%。[0101]=6.0Hz,lH,7.61-7.51m,3H,7.35d,J=8.8Hz,1H,7.30d,J=7.9Hz,2H,4.60dJ=6.0Hz,2H,4.29t,J=7.lHz,2H,3.65t,J=4.6Hz,4H,3.45s,2H,3.26t,J=6.2Hz,2H,3.18s,3H,2.91t,J=6.0Hz,2H,2.38dt,J=11.2,5.IHz,6H,2.26s,3H,1.91p，J=7.2Hz，2H,1.73-1.57m，4H,1.47dq，J=12.6,6.4Hz，2H。[0102]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.97,162.24,150.95,140.89,140.20,140.00,137.83,136.44,135.53,129.59,127.31,126.53,123.57,121.61,120.77,114.59,109.46,72.03,67.02,63.14,58.59,53.65,49.28,34.48,26.92,26.78,25.04,22.41,22.34,16.69〇[0103]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC35H44N5O4{[M+H]+}598.3393,found598.3364〇[0104]实施例5I-环己基-5-[6-4-甲基哌嗪-I-基）吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0105][0106]经过与合成实例3类似的反应，只是在最后一步中使用1-甲基-4-胺甲基_5,6,7，8-四氢异喹啉酮为原料，得到目的化合物，产率75%。[0107]==2.4Hz,lH,8.10s,lH,7.83d,J=8.9Hz,1H,7.71dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.50ddJ=9.0,1.4Ηζ,1Η,6.39d,J=8.8Hz,1H,5.67-5.37m,1H,4.68d,J=5.7Hz,2H,3.31t,J=5.0Hz,4H,2.94t,J=6.3Hz,2H,2.62s,2H,2.27t,J=5.3Hz,6H,2.22s,3H,2.16dd,J=Il.2,3.4Hz，2H,1.99-1.92m，2H,1.90s，3H,1.82-1.66m，5H,1.64-1.50m，2H，1.36dtd，J=13.1，9.7,3.7Hz，lH。[0108]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.92,159.54,158.20,150.38,146.43,145.96,141.34,135.72,133.70,127.37,125.81,125.08,120.90,120.35,119.09,114.99,114.82,106.51,60.90,54.54,46.05,45.05,35.99,33.68,29.70,27.52,25.71,25.41,24.85,22.25,16.50。[0109]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC35H44N7O2{[M+H]+}594.3556,found594.3526〇[0110]实施例6I-4-甲氧基-I-丁基-5-[6-吗啡啉-4-基吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶酮-3-基）甲胺[0111][0112]经过与合成实例3类似的反应，只是在最后一步中使用4-5-甲基吡啶-2-基）吗啉-3-硼酸频哪酯为原料，得到目的化合物，产率68%。[0113]1HNMR400MHz,Chloroform-d513.07s,lH,8.51dd,J=4.7,2.0Hz,2H,8.05t,J=6.1Hz,lH,7.85dd,J=8.8,2.6Hz,lH,7.57dd,J=8.8,1.7Hz,1H,7.44d,J=8.7Hz,lH,6.71d,J=8.8Hz,1H,5.97s,lH,4.64d,J=6.0Hz,2H,4.37t,J=7.IHz,2H,3.91-3.75m,4H,3.60-3.49m,4H,3.35t,J=6.2Hz,2H,3.28s,3H,2.44s,3H,2.38s,3H,2.06-1.91m,2H,1.62-1.47m,2H。[0114]13CNMR101MHz,Chloroform-d5165.63,162.29,158.61,150.50,146.32,143.00,140.01,137.57,136.61,132.89,126.87,125.89,123.63,122.34,119.83,109.78,109.70,106.75,72.02,66.77,58.60,49.30,45.73,34.95,26.90,26.77,19.71,18.81。[0115]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC30H37N6O4{[M+H]+}545.2876,found545.2886〇[0116]实施例72-环己基-5-[4-吗啡啉-4-基）甲基]苯基-IH-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶酮-3-基）甲胺[0117][0118]经过与合成实例3类似的反应，只是在步骤4反应时以2-环己基-5-溴吲唑-3-羧酸甲酯为原料，同时在步骤5中1-甲基-4-氰基-5,6,7,8-四氢异喹啉酮使用得到目的化合物，产率72%。[0119]=6.2Ηζ,1Η,7.66-7.60m,3H,7.48d,J=8.9Hz,1H,7.38d,J=7.9Hz,2H,5.96s,1H,4.64d,J=6.1Hz,2H,4.49-4.31m,lH,3.73t,J=4.6Hz,4H,3.54s,2H,2.48t,J=4.6Hz,4H,2.44s,3H,2.36s,3H,2.03td,J=11.7,10.6,4.2Hz,3H,1.98-1.88m,3H,1.78dt,J=13.2,3.3Hz,1H,1.46dddd,J=17.0,13.3,8.0,3.7Hz,2H,1.37-1.19m，3H。[0120]13CNMR101MHz,Chloroform-d5165.59,162.49,150.71,142.85,140.10,139.41,137.33,136.35,135.54,129.60,127.34,126.18,123.63,122.51,120.76,109.78,109.58,67.02,63.15,58.73,53.64,34.84,32.45,25.67,25.33,19.76,18.84。[0121]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC33H40N5O3{[M+H]+}554.313I,found554.3132〇[0122]实施例8I-环己基-5-[4-吗啡啉-4-基）甲基]苯基-IH-吲唑-3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0123][0124]以1-甲基-4-氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉酮为原料，经过与合成实例3类似的反应，得到目的化合物，产率81%。[0125]=1H,7.77d,J=9.0Hz,1H,7.45d,J=9.OHz,1H,7.37d,J=7.7Hz,2H,6.98d,J=7.7Hz,2H,5.48ttJ=10.1,5.OHz,1H,4.65d,J=5.7Hz,2H,3.39t,J=4.5Hz,4H,3.04s,2H,2.88t,J=6.3Hz,2H,2.18t,J=6.3Hz,2H,2.10q,J=5.2,4.8Hz,8H,1.88d,J=13.4Hz,2H,1.78s,3H,1.74-1.58m,4H,1.49qd,J=12.5,9.1,3.9Hz,2H,1.29dtd，J=19.4,16.1，14·8,5·0Ηζ，2Η。[0126]13CNMR101MHz,Chloroform-d5164.07,159.63,150.20,146.64,141.57,140.02,136.48,129.44,127.66,126.79,126.08,120.80,120.44,118.86,116.46,114.88,66.73,62.96,60.96,53.34,35.89,33.68,27.55,25.73,25.41,24.83,22.29,16.35。[0127]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC36H44N5O3{[M+H]+}594.3444,found594.3428〇[0128]实施例9卜4-甲氧基―丨-丁基-5-[6-4-甲基哌嗪-丨-基吡啶-3-基]-丨化吲唑―3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0129][0130]以1-甲基-4-氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉酮为原料，经过与合成实例3类似的反应，同时在步骤3中使用1-溴-4-甲氧基丁烷为原料，得到目的化合物，产率81%。[0131]=2.6Hz,1H,7.99t,J=6.0Hz,1H,7.75dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.49dd,J=8.8,1.7Hz,lH,7.35d,J=8.8Hz,lH,6.64d,J=8.8Hz,1H,4.59d,J=6.0Hz,2H,4.29t,J=7.1Hz,2H,3.55t,J=4.9Hz,4H,3.25t,J=6.2Hz,2H,3.18s,3H,2.91tJ=6.0Hz,2H,2.50t,J=5.OHz,4H,2.37t,J=6.OHz,2H,2.29s,3H,2.25s,3H,1.90p，J=7.3Hz,2H,1.78-1.56m,4H,1.47dq，J=12.6,6.4Hz,2H。[0132]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.88,162.26,158.44,151.00,146.27,140.88,139.97,137.60,136.54,132.94,126.38,125.84,123.62,121.56,119.70,114.61,109.68,106.92,72.01,58.58,54.80,49.27,46.10,45.16,34.49,27.35,26.88,26.76,25.02,22.38,22.32,16.68ο[0133]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC34H44N7O3{[M+H]+}598.3506,found598.354l〇[0134]实施例10I-4-甲氧基-I-丁基-5-[6-4-甲基哌嗪-I-基）吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰4，6-二甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶酮-3-基）甲胺[0135][0136]经过与合成实例3类似的反应，只是在步骤3中使用1-溴-4-甲氧基丁烷为原料，得到目的化合物，产率76%。[0137]1H匪R400MHz，Chloroform-dSl2.98s，lH，8.5卜8.50m，lH，8.49d，J=2.6Ηζ,1Η,8.04t,J=6.IHz,1H,7.83dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.57dd,J=8.8,1.7Hz,1H,7.43d,J=8.7Hz,lH,6.72d,J=8.8Hz,1H,5.96s,lH,4.63d,J=6.IHz,2H,4.37t,J=7.1Hz,2H,3.63t,J=5.IHz,4H,3.35t,J=6.2Hz,2H,3.28s,3H,2.58t，J=5.0Hz，4H,2.43s，3H,2.37s，6H,2.05-1.92m，2H,1.64-1.46m，2H。[0138]13C匪R101MHz，Chloroform-dδ165·57，162·30，158·45，150·53，146·28，142.97，139.97，137.54，136.56，132.99，126.38，125.88，123.62，122.34，119.70，109.79，109.68,106.93,72.02,58.59,54.81,49.29,46.12,45.17,34.94,26.89,26.76,19.71，18.81ο[0139]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC31H40N7O3{[M+H]+}558.3193,found558.3173〇[0140]实施例n卜环己基-5-[6-吗啡啉-4-基）吡啶-3-基]-1H-R引挫-3-甲酰[Q-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0141][0142]经过与合成实例3类似的反应，只是在最后一步中使用4-5-甲基吡啶-2-基）吗啉-3-硼酸频哪酯为原料，得到目的化合物，产率76%。[0143]==2.5Hz,lH,8.05s,lH,7.76d,J=8.9Hz,1H,7.67-7.56m,1H,7.41dd,J=9.0,1.5Hz,lH,6.22d,J=8.7Hz,lH,5.50tt,J=9.9,4.6Hz,1H,4.61d,J=5.8Hz,2H,3.46t,J=4.7Hz,4H,3.04t,J=4.8Hz,4H,2.89t,J=6.4Hz,2H,2.23t,J=6.3Hz,2H,2.15-1.98m,4H,1.86s,4H,1.74-1.60m,6H,1.49qt,J=12.8,4.OHz,2H,1.37-1.20m,lH。[0144]13CNMR101MHz,Chloroform-d5162.95,158.49,157.35,149.35,145.39,145.01,140.39,134.78,132.75,130.46,126.25,125.42,124.16,119.81,119.55,118.14,113.93d,J=2.6Hz,105.30,68.65,65.35,59.92,44.41,34.89,32.63,26.50,24.70,24.39,23.85,21.26,15.48。[0145]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC34H4iN6O3{[M+H]+}581.3240,found581.3229〇[0146]实施例12I-环戊基-5-[6-4-甲基哌嗪-I-基吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0147][0148]经过与合成实例3类似的反应，只是在步骤3中使用溴代环戊烷为原料，同时在步骤5中使用1-甲基-4-胺甲基-5,6,7,8-四氢异喹啉酮为原料，得到目的化合物，产率76%。[0149]==2.3Hz,lH,8.01s,lH,7.73d,J=8.9Hz,1H,7.62dd,J=8.8,2.5Hz,1H,7.41dJ=9.0Hz,lH,6.25d,J=8.7Hz,lH,5.96p,J=7.6Hz,1H,4.59d,J=5.7Hz,2H,3.18t,J=4.9Hz,4H,2.88t,J=6.3Hz,2H,2.17dt,J=9.8,6.IHz,10H,2.13s,3H,1.95dq，J=13.4,7.4Hz，2H,1.80s，3H,1.75-1.53m，6H。[0150]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.99,159.62,158.23,150.35,146.44,145.95,141.43,135.66,133.76,128.04,125.76,125.10,121.11,120.41,119.10,114.98,114.65,106.42,62.42,54.53,46.08,45.01,35.91,33.77,27.46,24.93,24.83,22.27,16.43〇[0151]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC34H42N7O2{[M+H]+}580.3400,found580.3393〇[0152]实施例131-环戊基-5-[4_吗啡啉-4-基）甲基]苯基-IH-吲唑-3-甲酰[I-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0153][0154]经过与合成实例3类似的反应，只是步骤3中使用溴代环戊烷为原料，同时在最后一步中使用6-吗啉-苯基-3-硼酸频哪酯酯为原料，得到目的化合物，产率79%。[0155]=1H,7.74d,J=8.9Hz,lH,7.44d,J=9.OHz,1H,7.37d,J=7.6Hz,2H,6.95d,J=7.7Hz,2H,5.97p,J=7.7Hz,lH,4.64d,J=5.8Hz,2H,3.37t,J=4.5Hz,4H,3.00s,2H,2.90d,J=6.6Hz,2H,2.28-2.13m,6H,2.08t,J=4.4Hz,4H,2.00-1.89m,2H,1.77s,3H,1.73-1.56m,6H。[0156]13C匪R101MHz，Chloroform-dδ163.08,158.68,149.17,145.62,140.58,138.99,135.43,135.15,128.41,127.35,125.74,125.06,119.97,119.54,117.82,115.29，113.82,65.68,61.92,61.41,52.28,34.79,32.77,28.66,26.44,23.93,23.79,21.27，15.25〇[0157]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC35H42N5O3{[M+H]+}580.3288,found580.3262〇[0158]实施例14I-4-甲氧基-I-丁基-5-[6-吗啡啉-4-基）吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰[1-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0159][0160]经过与合成实例3类似的反应，只是步骤3中使用1-溴-4-甲氧基丁烷为原料，同时在最后一步中使用6-吗啉-苯基-3-硼酸频哪酯酯为原料，得到目的化合物，产率68%。[0161]1H匪R400MHz，Chloroform-dSl3.18s，lH，8.53d，J=1.6Hz，lH,8.51d，J=2.5Hz,1H,8.06t,J=6.1Hz,1H,7.85dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.58dd,J=8.7,1.7Hz,lH,7.44d,J=8.7Hz,lH,6.71d,J=8.8Hz,1H,4.67d,J=6.0Hz,2H,4.38t,J=7.1Hz,2H,3.86t,J=4.8Hz,4H,3.56t,J=4.8Hz,4H,3.35t,J=6.2Hz,2H,3.27s,3H,3.00t,J=6.0Hz,2H,2.46t,J=5.9Hz,2H,2.34s,3H,1.99p,J=7.3Hz,2H，1.75tt，J=11.8,6.5Hz，4H，1.56dq，J=12.7,6.4Hz，2H。[0162]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.86,162.27,158.62,150.99,146.34,140.71,140.02,137.65,136.62,132.87,126.91,125.86,123.66,121.68,119.88,114.57,109.69,106.75,72.04,66.79,58.61,49.30,45.74,34.49,27.36,26.91,26.78,25.05,22.41,22.33,16.76。[0163]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC33H4iN6O4{[M+H]+}585.3189,found585.320Io[0164]实施例151-环己基-5-[6-吗啡啉-4-基）吡啶-3-基]-IH-吲唑-3-甲酰[I-甲基-3-氧-2，3，5，6，7，8-六氢喹啉-4-基）甲基]胺[0165][0166]经过与合成实例3类似的反应，只是步骤3中使用溴代环戊烷为原料，同时在最后一步中使用6-吗啉-吡啶-3-硼酸频哪酯酯为原料，得到目的化合物，产率80%。[0167]==5.9Hz,lH,8.11s,lH,7.82d,J=8.9Hz,1H,7.69dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.47ddJ=9.0,1.6Hz,lH,6.29d,J=8.8Hz,1H,6.05p,J=7.6Hz,1H,4.67d,J=5.9Hz,2H,3.55t,J=4.8Hz,4H,3.11t,J=4.8Hz,4H,2.99t,J=6.4Hz,2H,2.38-2.19m,4H,2.03dt，J=10.6,4.4Hz，2H,1.95s，3H,1.85-1.66m，4H。[0168]13CNMR101MHz,Chloroform-d5163.92,159.63,158.39,150.36,146.45,146.05,141.32,135.84,133.76,128.00,126.51,125.20,121.09,120.84,119.15,114.89,106.33,66.39,62.48,45.43,35.85,33.76,27.45,24.92,24.90,22.31,16.52。[0169]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC33H39N6O3{[M+H]+}567.3084,found567.3106〇[0170]实施例162-环己基-5-[6-吗啡啉-4-基）吡啶-3-基]-2H-吲唑-3-甲酰4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶酮-3-基）甲胺[0171][0172]经过与合成实例6类似的反应，只是在最后一步反应时以2-4-甲基哌嗪-1-基吡啶-5-硼酸频那醇酯为原料，得到目的化合物，产率85%。[0173]1HNMR400MHz,Chloroform-dδ11.86s,lH,8.50ddJ=8.8,2.1Ηζ,2Η,7.93t,J=6.2Hz,lH,7.84dd,J=8.8,2.6Hz,1H,7.56dd,J=8.8,1.7Hz,1H,7.48d,J=8.8Hz,lH,6.73d,J=8.8Hz,lH,5.94s,lH,4.63d,J=6.2Hz,2H,4.40dq,J=10.8,5.0Hz,lH,3.64t,J=5.OHz,4H,2.59t,J=5.OHz,4H,2.44s,3H,2.39s,3H,2.33s，3H,2.12-1.87m，7H，1.47q，J=12.7Hz，2H。[0174]13C匪R101MHz，Chloroform-dδ165·16，162·52，158·43，150·58，146·33，142.33,139.19,137.11,136.61,132.94,126.51,125.47,123.75,122.76,119.78,109.80，109.60,106.92,58.76,54.82,46.12,45.18,34.83,32.44,29.71,25.67,19.75,18.95。[0175]HR-MSESI-TOFmz:CalcdforC32H40N702{[M+H]+}554.3243,found554.3215〇[0176]实施例17本发明化合物抑制肿瘤细胞株增殖的实验[0177]乳腺癌细胞株]\«^-7、]\0^-]\©-231、]\0^-]\©-435、]\0^-]\©-453和81'-474，黑色素瘤细胞株WM-266-4、CHL-l和A875,弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株SU-DHL-6、Pfeiffer均购自于美国标准生物品收藏中心（AmericanTypeCultureCollection，ATCC，DMEM、RPMI1640培养基、胎牛血清FBS均购买自美国GIBICO公司；青霉素和链霉素购自Biosharp公司；培养细胞用平皿和96孔板等购买于Corning公司；各种规格的离心管购自BD公司;MTT试剂购自Sigma公司。[0178]乳腺癌细胞株]\«^-7、]\0^-]\©-231、]\0^-]\©-435、]\0^-]\©-453和81'-474，黑色素瘤细胞株WM-266-4、CHL-l和A875，弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株SU-DHL-6和弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株Pfeiffer均用含10%胎牛血清FBS、100IUmL青霉素、lOOygml链霉素的RPMI1640完全培养基培养于37°C、5%C02的培养箱中培养。[0179]为了检测新化合物对细胞的增殖影响。收集处于对数生长期的细胞，调整细胞浓度为1000〜5000个mL的单细胞悬液，按照每孔IOOyL接种于96孔板中。将化合物储备液10mML溶于DMS0用培养基稀释成不同浓度，采用三倍稀释法。按每孔IOOyL的体积加入96孔板中，最高浓度为30μΜ，最低浓度为0.ΙμΜ，每个药物浓度设置3个复孔，并用含0.1%DMS0培养基和纯培养基处理细胞作为阴性对照，置细胞培养箱中继续培养4天或6天，采用MTT检测细胞线粒体脱氢酶活性，并计算新化合物对肿瘤细胞的半数有效抑制浓度（IC5q^M值表1〇[0180]表1化合物对三种淋巴瘤细胞株的增殖作用MTTfe[0181]

权利要求：.吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，结构如式〗所示：其中，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为O或N;Ri〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基、-CF3、-NO2、Cl〜C4烷氧基、卤素；或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基；尺4、1^独立地为-^?3、05〜08环烷基、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基或苄、、基；m=l〜6;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-N〇2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环每基;n=0〜4;R7为_H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基。2.根据权利要求1所述的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，其特征在于:W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;R1〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、卤素;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基；R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基、\Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜6;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-\NH2、卤素苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为-H、ci〜C4烷基、C5〜C8环烷基或节基；优选的，1、乂、¥、2独立地为~或：;¥为0或11?1〜1?3独立地为-!1、：1〜04烷基;或，1?2和1?3组合形成环，所述环为C5〜C8环烷基;R4、R5独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、、C1〜C4烷基、C1〜C4烷氧基或苄基，m=l〜6;1?6独立地为-0?3、：1〜04烷基、：1〜04烷氧基、-N〇2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;Ri〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、fe独立地为-H、-CF3、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基.Cl〜C4烷氧基或苄基，m=l〜6;R6独立地为-CF3Xl〜C4烷基、Cl〜C4、.烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；优选的，1、乂、¥、2独立地为~或：;¥为0或11?1〜1?3独立地为-!1、：1〜04烷基;或，1?2和1?3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基或苄基，m=1〜4;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;1?7为-1：1〜04烷基工5〜08环烷基或苄基；进一步优选的，W、x、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;Ri〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基、Cl〜C4烷基或m=1〜4;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素、苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为-H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；更进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;R1-R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为-H、C5〜C8环烷基或m=1»〜4;R6独立地为-CF3、Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、-NO2、-NH2、卤素苄基或C5〜C8环烷基，n=0〜4;R7为_H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；优选的，1、乂、¥、2独立地为~或：;¥为0或11?1〜1?3独立地为-!1、：1〜04烷基;或，1?2和1?3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;R6独，.立地为Cl〜C4烷基、Cl〜C4烷氧基、卤素h或C5〜C8环烷基，η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；进一步优选的，W、X、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;Ri〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;R6独立地为Cl〜C4烷基或η=0〜4;R7为-H、Cl〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；更进一步优选的，W、x、Y、Z独立地为N或C;V为0或N;R1-R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;R4、R5独立地为_H、C5〜C8环烷基或’m=l〜4;R6独立地为n=0〜2;R7为-H、C1〜C4烷基、C5〜C8环烷基或苄基；优选的，1、乂、¥、2独立地为~或：;¥为0或11?1〜1?3独立地为-!1、：1〜04烷基;或，1?2和1?3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、恥独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;R6独立地为η=O〜2;R7为-H、Cl〜C4烷基或苄基；.，进一步优选的，W、x、Y、Z独立地为N或C;V为O或N;Ri〜R3独立地为-H、Cl〜C4烷基;或，R2和R3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、1?5独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;R6独立地为n=0〜2;R7为-H或Cl〜C4烷基；最优的，1、乂、¥、2独立地为~或：;¥为0或11?1〜1?3独立地为-!1、：1〜04烷基;或，1?2和1?3组合形成环，所述环为C5〜C6环烷基;1?4、恥独立地为_H、C5〜C8环烷基或m=l〜4;R6独立地为η=0或I;R7为-H或Cl〜C4烷基。3.根据权利要求1所述的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，其特征在于:所述吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物的结构式为：4.权利要求1〜3任一项所述吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物的盐或水合物。5.药物组合物，是由权利要求1〜3任一项所述的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物添加药学上可以接受的辅助性成分制备而成的。6.权利要求4所述吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物的盐或水合物、权利要求5所述药物组合物在制备抗肿瘤药物或自身免疫疾病药物中的用途。7.根据权利要求6所述的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物的用途，其特征在于:所述的肿瘤为脑癌、成胶质细胞瘤、白血病、淋巴瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、维尔姆斯瘤、尤因肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、胃癌、膀胱癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、肾脏癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤或甲状腺癌。8.根据权利要求6所述的吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物，其特征在于:所述的自身免疫性疾病为银肩病或红斑狼疮。

百度查询： 四川大学;普洛药业股份有限公司 吲唑-甲酰胺-吡啶酮衍生物及其制备方法和用途

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